摘要:目的：合成4-硝基-1-萘基磷酸酯 (4-nitro-1-naphthyl phosphate，NNPP)为显色底物测定牛小肠粘膜碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase, ALP)。方法：4-硝基-1-萘酚(4-nitronaphthol, 4-NNP)与三氯氧磷反应，经硅胶柱纯化制得NNPP；检测产物吸收跟踪水解过程测定初速度，双倒数法测定米氏常数(Michaelis-Menten constant, Km)。结果：ALP水解NNPP产物最大差吸收峰接近460 nm，等吸收波长接近405 nm。与p-硝基苯酚相比，在pH 6.0~7.0间4-NNP消光系数为其3倍以上，在pH 7.0以上为其2倍以上。ALP对NNPP的Km约12?mol/L而p-硝基苯基磷酸酯的Km约35?mol/L，产物磷酸相对NNPP的竞争性抑制常数接近20?mol/L。ALP催化NNPP水解效率接近水解p-硝基苯基磷酸酯的40％。结论：NNPP可用于测定ALP活性, 且有望与作用于p-硝基苯酚类显色底物的其它酶联用实现单通道两种酶同步测定。

摘要:目的：观察鼠γ疱疹病毒(γHV68)感染对C57BL/5J小鼠肝脏脂质积聚的影响并探讨其潜在机制。方法：采用高脂饮食喂养C57BL/6J小鼠,并用腹腔注射病毒的方法感染小鼠,处理18周后,检测血清炎症因子含量和肝脏组织炎症因子的表达,对小鼠肝脏进行HE和油红O染色,并用荧光定量逆转录PCR和Western blot检测脂肪酸代谢途径中关键基因的mRNA和蛋白表达。结果：与单纯高脂饮食喂养的小鼠比较,病毒感染小鼠的血清白介素6和血清淀粉样蛋白A含量增加,肝脏肿瘤坏死因子表达水平也升高,肝脏组织的脂肪变性程度加重,肝脏内甘油三酯和游离脂肪酸的含量明显高于对照组。同时病毒感染促进了小鼠肝脏的固醇调节元件结合蛋白1,脂肪酸合成酶和乙酰辅酶A羧化酶的mRNA和蛋白表达。结论：腹腔注射疱疹病毒能成功感染C57BL/6J小鼠,引起小鼠全身系统性和肝脏局部的炎症反应,促进脂质在肝脏的异常积聚,这可能与炎症状态下脂肪酸合成与羧化的关键基因表达异常增加有关。

摘要:目的：研究炎症是否通过影响核转录因子固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)而致C57BL/6J小鼠肝脏脂质的异常聚集。方法：将8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组(n=6)和炎症组(n=6)组,两组均喂以高脂饮食,炎症组小鼠皮下注射酪蛋白建立慢性炎症模型,对照组注射相应量磷酸盐缓冲液,18周后处死,测定血清中炎症介质水平及肝脏中的脂质水平,油红O染色观察肝脏脂质沉积情况,实时定量PCR和Western blotting检测肝脏炎症因子TNF-α、MCP1及脂肪酸合成相关基因SREBP1、ACCα、FAS的基因和蛋白水平。结果：与对照组相比,炎症组血清中的炎症因子IL-6和SAA水平以及肝脏中炎症因子MCP1 和 TNF-α的mRNA和蛋白水平均显著上升(P<0.05)。炎症状态下,肝脏甘油三酯和游离脂肪酸含量显著高于对照组(分别为0.21?0.07 vs 0.40?0.14mg/mg,P<0.05；3.80?0.58 vs 5.38?1.38nmol/mg,P<0.05)。油红O结果显示,炎症使脂质积聚更显著。SREBP1及其下游与脂肪酸和甘油三酯合成相关的基因ACCα,FAS的mRNA和蛋白水平在炎症组均显著上升(P<0.05)。结论：炎症可能通过上调SREBP1,加重脂质在肝脏的聚集。

摘要:目的：研究高温后人体组织DNA的提取方法对DNA-STR分型的影响。方法：用不同浓度TritonX-100处理高温后的人体组织样本，采用Chelex-100提取DNA的方法，经DNA-STR复合扩增，用ABI-3130序列分析仪电泳分离并运用Gene mapper ID V3.2基因分析软件对基因进行分型。结果：用1% TritonX-100+Chelex-100处理样本后提取DNA，再经QIA quick PCR纯化后可检出全部基因座且基因座能较平衡地扩增。结论：该方法简便易行，实验效果好，是法科学领域中一种值得推荐的方法，尤其适合检案。

摘要:目的：从乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）低拷贝的血清样本中提取病毒DNA并通过PCR扩增得到全长DNA片段。将全长片段经过环化处理后转染HuH7细胞，体外评价病毒的复制水平。方法：设计含有BspQⅠ酶切位点的HBV全长扩增引物和分段扩增引物，选择HBV低拷贝的临床病人血清样本，经抽提纯化后的病毒DNA作为模板，用巢式PCR结合分段扩增的方法扩增得到HBV全长DNA，PCR产物经BspQⅠ酶切后自连环化，将环化的HBV DNA转染HuH 7细胞，经5 d细胞培养，提取细胞中的病毒复制中间体，通过Southern blot分析病毒复制水平。结果：通过PCR扩增得到5个HBV全长DNA，经过酶切连接全长基因后转染HuH7细胞，Southern blot检测均有复制表达。结论：本实验成功构建能够有复制表达的HBV环化全长，为研究血清中低拷贝HBV病毒的不同病人复制水平与DNA序列关系打下基础。

摘要:目的：探讨计算机断层扫描血管成像（computed tomography angiography，CTA）对应用二级脾蒂离断法行腹腔镜脾切除术（laparoscopic splenectomy，LS）的临床价值。方法：收集62例特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）患者的临床资料进行回顾性分析，比较术前行CTA检查（CTA组）与未行CTA检查行LS（对照组）的两组病例资料。结果：两组手术时间分别为（185.58±14.09） min和（215.00±22.01） min，两组术中出血分别为（165.78±88.42） ml和（262.78±80.70） ml，两组住院时间分别为（8.46±1.48） d和（10.14±1.51） d，以上各组差异有统计学意义（P<0.05）。结论：CTA组术前能掌握脾脏血管的解剖及其与胰腺的关系，指导术中精细解剖脾脏血管，采用Hem-O-lok结扎、超声刀离断脾蒂血管，免用Endo-GIA，较对照组手术时间短、术中出血少、住院时间短。本研究认为CTA检查对ITP需行LS治疗的患者具有临床价值。

摘要:目的：对比分析远端胃癌腹腔镜D2根治术与传统开腹术的临床近期疗效，探讨腹腔镜D2根治术的应用价值。方法：选取本院2008年12月至2012年3月胃癌患者60例，行腹腔镜手术患者30例为观察组；行传统开腹手术患者30例为对照组。观察比较两组患者切口长度、手术时间、术中出血量、首次肛门排气时间、清扫淋巴结数、术后住院时间、术后并发症等临床疗效指标。结果：腹腔镜组/开腹组：切口长度（5.98±1.56） cm/（13.02±2.15） cm（t=14.52，P=0.000）；手术时间：（189.02±13.78）min/（150.58±15.31） min（t=10.22，P=0.000）；术中出血量：（100.89±23.03） ml/（156.36±30.37） ml（t=7.97，P=0.000）；首次肛门排气时间：（3.67±1.56） d/（5.04±2.08） d（t=2.89，P=0.005）；淋巴结清扫数：（18.87±5.03）枚/（17.03±3.67）枚（t=1.62，P=0.011）；术后住院时间:（10.58±3.17） d/（13.59±4.36） d（t=3.06，P=0.003）。组间差异均具有统计学意义。结论：腹腔镜辅助远端胃癌D2根治术较传统的开腹手术治疗在临床近期疗效方面具有较大的优势。

摘要:目的：比较完全后腹腔镜下肾输尿管根治术与开放手术治疗上尿路移行细胞癌的临床疗效。方法：44例上尿路移行细胞癌患者行肾输尿管根治术，其中15例为腹腔镜手术组，采取完全后腹腔镜下手术，29例为开放手术组，采取开放肾输尿管根治性手术。比较2组患者的手术时间、术中出血量、术后止痛药应用时间和剂量、胃肠道功能恢复时间、下床活动时间、术后住院时间和并发症，并随访6~42月，比较2组膀胱肿瘤发生及远处转移、存活时间等。结果：2组手术均获成功。腹腔镜手术组与开放手术组比较，出血量明显减少（116.1±29.4） ml vs. （278.6±84.3） ml，P=0.000；止痛药（杜冷丁注射液）应用时间短（0.7±0.5） d vs. （2.3±0.9） d，P=0.000；剂量少（33.3±24.4） mg vs. （155.2±62.8） mg，P=0.000；下床活动早（2.1±0.5） d vs. （4.2±1.0） d，P=0.000；术后住院时间短（8.7±1.6） d vs. （13.1±3.2） d，P=0.000。腹腔镜手术组手术时间较短（212.1±19.5） min vs. （251.7±24.2） min，P=0.000，肠道功能恢复较快（1.9±0.8） d vs. （2.9±0.8） d，P=0.00１，但与开放手术组比较差异无统计学意义（P >0.05）。随访6~42月，2组病人均存活，术后并发症、肿瘤复发及转移差异无统计学意义（P >0.05）。结论：完全后腹腔镜下肾输尿管根治术具有微创并与开放手术相同的肿瘤学效果，将成为上尿路移行细胞癌的理想手术方法。

摘要:目的：了解儿童急性荨麻疹与感染的关系，探讨儿童感染性急性荨麻疹的临床特征。方法：对149例儿童急性荨麻疹住院病例的临床资料进行回顾性研究。结果：（1）149例儿童急性荨麻疹中，感染引起的有127例，占85.2%，以呼吸道感染为主。血常规以白细胞、中性粒细胞、C反应蛋白升高为主，提示可能以细菌感染居多。（2）病毒感染中，柯萨奇病毒阳性率达24.5%，明显高于其他6种常见病毒感染率。（3）皮损特点：皮疹持续时间约0.5~1.0 d；易泛发全身；以环状或地图状风团样丘疹或斑块为主，少数可伴出血或紫癜，部分病例皮疹消退不完全，可遗留地图样淡红色边缘或色素沉着；此外常合并血管性水肿（53.5%）；皮肤表现与感染控制情况与否相伴行；病程约7.0~11.0 d；（4）除皮疹外常伴发消化道症状（64.4%）；43.5%的患儿伴肌酸激酶同工酶升高；（5）抗过敏的同时加用抗感染药物治疗（7.0~10.0 d）可治愈。结论：（1）感染是儿童急性荨麻疹的最主要原因，可能以细菌感染居多；（2）病毒感染以柯萨奇病毒为主；（3）儿童感染性急性荨麻疹在皮疹方面有其特殊性；（4）常伴发消化道症状，部分可能存在心肌损害；（5）治疗上应重视足够疗程的抗感染治疗。

摘要:目的：探讨拖出式单、双吻合术式在超低位直肠癌保肛术中应用的优缺点。方法：回顾我院胃肠外科2008年7月至2011年7月期间收治直肠癌患者共计1 138人，行拖出式吻合法超低位直肠前切术患者共113例，其中行拖出式双吻合器法保肛术（double stapling technique，DST）64例，行经肛门拖出单吻合器法保肛术（single stapling technique，SST）49例，分别统计：手术时间，术后发生并发症，如吻合口瘘、吻合口出血、吻合口狭窄的发生率，随访1~4年内盆底局部复发情况，住院时间及住院费用等，通过统计学分析探讨2种吻合方式的优缺点。结果：2组平均手术时间及术后平均住院时间差异无统计学意义（手术时间t=0.172，P=0.864；平均住院时间Z=-0.562，P=0.547）。术后并发症：其中吻合口瘘发生差异有统计学意义（χ2=6.592，P=0.01）；其他并发症情况差异无统计学意义（χ2=0.037，P=0.848）。局部复发：随访1~4年2组盆底局部复发差异无统计学意义（χ2=1.839，P=0.175）。平均住院费用2组差异有统计学意义（Z=-5.782，P=0.00）。结论：拖出式吻合法已成为超低位直肠癌保肛术常用术式，拖出式SST保肛术较拖出式DST保肛术具有操作简单、安全、费用更低、切除完整复发率较低等优势，在其适用范围内有有较大临床使用价值。

摘要:

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摘要:【摘要】 目的 了解我国四川、新疆两省HIV感染者固定性伴侣(Regular sex partners,PAR)对暴露前预防用药(Pre-exposure Prophylaxis,PrEP)的接受意愿及其影响因素。方法 采用非随机抽样,对473位合格的研究对象进行面对面匿名问卷调查。采用 检验进行单因素分析,利用logistic回归进行多因素分析。结果 我国四川、新疆两省的PAR对PrEP的知晓率不高,85.41%从未听说过PrEP,调查人员对PAR人群进行PrEP相关内容的讲解后,PrEP的接受意愿达到了80.34%。经Logistic回归分析,PAR人群PrEP接受意愿的影响因素包括民族(维吾尔/汉族：OR=2.471,P=0.0093)、月收入水平(<=1000元/1001元-3000元：OR=2.046,P=0.0184)、半年内是否与配偶发生过性行为(是/否：OR=2.263,P=0.0192)、自认为从配偶处感染HIV的可能性(可能性一般/大：OR=0.485,P=0.0651；可能性小/大：OR=0.447,P=0.0273)、是否建议朋友使用PrEP(会/不会：OR=9.416,P<.0001)、配偶查出感染HIV的时间(三年之内/一年内：OR=0.478,P=0.0599；三年前/一年内：OR=0.374,P=0.0094)。结论 我国四川、新疆两省的PAR对PrEP的知晓率低,接受意愿高,在今后的艾滋病干预工作中,应加大PrEP的宣传力度,提高其知晓率,进一步提高接受意愿。同时,不妨尝试在该人群中开展同伴教育,这可能是推广PrEP的有效方式。