主管单位 :重庆市教育委员会
主办单位 :重庆医科大学
编辑部 :《重庆医科大学学报》编辑部
主编:黄爱龙
编辑部主任 :唐秋姗
国际标准刊号:ISSN 0253-3626
国内统一刊号:CN 50-1046/R
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樊 宇 ,杨 春 ,何永林 ,徐 蕾 ,卢 楠 ,穆柳青 ,张春燕 ,康月茜
2015, 40(9):1167-1171.
摘要:microRNA(miRNA)是一类广泛存在于各种生物体内的小分子非编码单链RNA,主要在转录后水平调控靶基因的表达。越来越多的证据表明它在细胞分化与沟通、机体发育、免疫反应等诸多方面都发挥着重要作用。尤其在疾病相关研究中,miRNA更是具有广泛的用途和美好的前景。本文主要针对miRNA的相关特性、与结核病(tuberculosis,TB)相互关系的研究进展以及应用前景等做综述。
2015, 40(9):1172-1174.
摘要:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是常见致病菌,其表面蛋白质在感染宿主过程中发挥重要作用,其中SdrE蛋白质为其表面蛋白质之一,研究发现 SdrE蛋白质的表达几乎不受环境因素(包括温度、金属离子)的影响,并且可能与S.aureus对甲氧西林的抵抗力有关,近年来发现SdrE蛋白质的磷酸化直接影响了S.aureus的毒性,同时,SdrE蛋白质能够通过黏附补体调节因子H来逃避宿主免疫反应,并且还能够独立诱导血小板发生聚集,已经发现SdrE蛋白质能够在骨骼感染、关节感染以及骨髓炎中发挥重要作用。本文主要分析了SdrE蛋白质的生物学功能,为基于SdrE蛋白质的新的特异性抗菌药物的开发指明方向和提供理论基础。
项 云,周爱娥,王 维,王 磊,黄益飞,金春芳,王子萌,尹一兵,何於娟
2015, 40(9):1175-1180.
摘要:目的:研究肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)荚膜多糖(capsular polysaccharide,CPS)对C57BL/6小鼠急性中耳炎的炎症应答和组织损伤的作用。方法:首先通过同源重组的方式构建TIGR4Δcps菌株,然后经鼓膜穿刺,分别接种5 μl/耳的TIGR4和TIGR4Δcps于C57BL/6小鼠的双侧中耳腔,对照组采用相同方法接种等体积无菌磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)。观察小鼠发病情况,分别于感染后1、3、5 d制备中耳组织切片,HE染色观察中耳组织损伤及炎性细胞浸润变化,同时收集中耳灌洗液(middle ear lavage fluids,MELF),检测MELF中细菌载量、炎性细胞数量和细胞因子含量。结果:成功构建了TIGR4Δcps菌株。与TIGR4组相比,TIGR4Δcps组小鼠中耳上皮的损伤更轻,中性粒细胞募集减少(第1天时P=0.004;第3天时P=0.000;第5天时P=0.000),MELF中细胞因子TNF-α和IL-6水平更低(第1天时P=0.076、P=0.000;第3天时P=0.002、P=0.003;第5天时P=0.000、P=0.000),但细菌清除更快(第1天时t=2.659,P=0.029;第3天时t=3.717,P=0.006)。结论:在S.pn TIGR4致小鼠急性中耳炎过程中,CPS具有加重炎症应答和组织损伤,并导致宿主对S.pn的清除减慢的作用。
2015, 40(9):1181-1185.
摘要:目的:探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)在感染宿主细胞中,miR-134对人少突胶质瘤细胞(oligodendro-cyte,OL)增殖水平的影响。方法:应用real-time PCR方法检测正常的OL细胞和BDV感染的OL细胞(OL/BDV)中的miR-134表达水平,同时分别将BDV phosphoprotein(P24),nucleoprotein(P40)蛋白真核表达载体转染OL细胞,检测对miR-134的作用;通过miR-134过表达和BDV感染OL细胞,采用流式细胞仪检测miR-134和BDV对OL细胞增殖的影响。结果:real-time PCR表明miR-134在OL、OL/BDV 细胞中的表达出现明显差异(P=0.000),并且BDV 中的P24蛋白对miR-134有明显的上调作用(P=0.000),但P40对miR-134没有明显作用(P=0.139);流式细胞仪结果显示miR-134过表达(P=0.016)和BDV感染(P=0.001)均可以抑制OL细胞的增殖能力。结论:BDV感染可通过P24蛋白上调OL细胞中miR-134的表达,进而导致细胞增殖水平下降。
王建敏,马 峰,徐红梅,王丽滨,邢 燕,粟玉凤,张雪梅,王 虹
2015, 40(9):1186-1192.
摘要:目的:明确肺炎链球菌糖酵解关键酶烯醇化酶(enolase,Eno)和热休克蛋白DnaJ是否有直接结合及结合位点。方法:原核表达并纯化Eno全长蛋白,鉴定其酶活性,利用重组Eno蛋白皮下免疫昆明小鼠制备特异性抗血清,分析其胞外分泌情况;采用生物膜层干涉(biolayer interferometrvy,BLI)技术和直接结合实验鉴定Eno和DnaJ两者之间是否存在直接相互作用;在前者结果阳性的基础上,截短表达Eno蛋白,通过直接结合实验鉴定Eno蛋白结合DnaJ的位点。结果:成功表达重组Eno蛋白,纯度达90%,该蛋白具有酶活性;重组Eno蛋白皮下免疫昆明小鼠后,获得效价达1∶7.68×106的特异性抗血清;Western blot分析显示,7种不同血清型肺炎链球菌培养上清中均在分子量约47 kD处出现特异性反应带;直接结合试验显示,随着Eno蛋白浓度增加,Eno与DnaJ的结合量也相应增加(r=0.920,P=0.000),其吸光度值从0.222±0.042(12.5 μg/ml)增加到0.569±0.099(200.0 μg/ml);BLI技术测定两者结合的亲和常数为926 nmol/L;截短的Eno(aa1~aa100)与DnaJ的结合量2.25±0.38高于其他截短序列的结合量0.94±0.25、1.08±0.09、0.75±0.12,差异具有统计学意义(P=0.000,P=0.001,P=0.000)。结论:肺炎链球菌Eno蛋白与DnaJ蛋白存在直接结合作用,结合位点主要位于其N端的1~100个氨基酸序列。
2015, 40(9):1193-1198.
摘要:目的:检测屎肠球菌菌毛样结构蛋白基因pilA和类透明质酸酶基因hylEfm在临床感染株中的分布,探讨屎肠球菌感染率持续上升的原因。方法:采用多重PCR检测临床感染株、住院患者肠道定植株和健康志愿者肠道定植株的pilA和hylEfm基因的分布;然后通过接合实验确认pilA和hylEfm基因在屎肠球菌间的传递方式;最后采用分子杂交法确认转移后pilA和hylEfm的质粒或染色体定位。结果:137株屎肠球菌感染株中共筛查确认120株携带pilA基因,阳性率为88%;21株携带hylEfm基因,阳性率为15%。分离鉴定住院患者肠道定植株、健康志愿者肠道定植株各50株,pilA基因阳性菌株分别为35株(阳性率70%)、26株(阳性率52%),临床感染株与住院患者肠道定植株、健康志愿者肠道定植株pilA基因携带率差异具有统计学意义(P<0.000 1;P=0.008 0)。接合实验证实pilA和hylEfm基因均能通过质粒的接合在不同菌株间进行传递,并同时伴随耐药基因传递。Southern Slot杂交发现pilA与hylEfm基因可位于同一大质粒上,不同菌株间此质粒大小存在差异(145.5~291 kb)。结论:临床感染患者分离屎肠球菌大多携带pilA基因。pilA和hylEfm基因可通过同一个可移动大质粒在菌株之间进行传递,同时伴随耐药基因的转移。
2015, 40(9):1199-1203.
摘要:目的:从大容量甲状腺髓样癌(medullary thyroid carcinoma,MTC)人源噬菌体单链抗体(single chain variable fragments,scFv)库中筛选出特异的抗MTC单链抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:分别以甲状腺上皮细胞TEC细胞株和MTC细胞TT细胞株为抗原进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的富集循环,筛选出抗MTC抗体,将筛选出的阳性克隆感染E.coli HB2151;异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导抗体可溶性表达,HiTrapTM Anti E-tag柱纯化表达抗体;SDS-PAGE和Western blot检测抗体表达和相对分子质量;ELISA检测可溶性scFv的特异性和免疫活性,分为TT细胞组、SW480细胞组、TEC细胞组和PBS空白对照组,分别检测各组在酶标仪A450 nm处的吸光度;四甲基偶氮唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)分别检测TT细胞组、SW 480细胞组与不同浓度svFv反应并读取A490 nm处的吸光度,设置空白对照PBS组,分别计算细胞抑制率。结果:5轮筛选后,抗体得到了明显富集。随机挑取单个细菌克隆,phage ELISA 和scFv ELISA阳性率分别为65%和50%。SDS-PAGE、Western blot结果显示MTC特异性抗体分子量为28 kD左右。ELISA结果显示,TT细胞组的吸光度(0.41±0.12)较SW 480细胞组(0.20±0.03)、TEC细胞组(0.13±0.01)、PBS空白对照组(0.07±0.01)明显增加(P=0.000)。MTT法结果显示,TT细胞组和SW 480细胞组在scFv浓度为0.1、1、10 μmol/L时,2细胞株间抑制率有统计学意义,统计量分别是t=2.881,P=0.02;t=5.073,P=0.006;t=7.324,P=0.000,且在scFv浓度为10 μmol /L时,对TT细胞的抑制率最高(0.59±0.15)%。结论:利用噬菌体抗体库技术成功获得了特异性的抗MTC人源单链抗体。
2015, 40(9):1204-1209.
摘要:目的:拟寻找和确定人第6号染色体q26-q27区域的SLC22A3 基因intron7序列中具有重要负性调控功能的核心调控元件的具体序列位置。方法:用基因重组的方法,分别构建intron7截短型野生重组质粒,分段查找该负性调控元件的具体序列位置。以包含人SLC22A3基因全长序列的细菌人工染色体为模板,PCR 扩增所需截短型片段,分别插入荧光素酶报告基因载体pGL3-Promoter,将重组质粒与内参质粒pRL-SV40以50∶1的比例共转染HEK293T细胞,24 h后检测荧光素酶活性(lu-ciferase activity),通过对比重组质粒和pGL3-Promoter荧光素酶活性,判断插入片段是否具有调控作用,并对发现的元件进行转录因子结合位点预测。结果:截短型野生重组质粒pGL3-pro-SLCi7-NO6,pGL3-pro-SLCi7-NO10,pGL3-pro-SLCi7-NO6.2,pGL3-pro-SLCi7-NO6.3,p-GL3-pro-SLCi7-NO10.2,pGL3-pro-SLCi7-NO6.21,pGL3-pro-SLCi7-NO10.22各组荧光素酶活性较pGL3-Promoter组降低(P<0.05);而截短型野生重组质粒pGL3-pro-SLCi7-NO6.21-300 bp(P>0.05)和pGL3-pro-SLCi7-NO10.22-300 bp(P >0.05)组荧光素酶活性较pGL3-Promoter组无统计学差异。结论:人类第6号染色体q26-q27区域的SLC22A3基因intron7序列中存在2个负性调控元件,为今后进一步对SLC22A3基因蛋表达调控方面的研究提供了理论依据。
2015, 40(9):1210-1214.
摘要:目的:建立裸鼠胶质瘤肝脏转移模型,探讨3.0T磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)对模型肝脏转移灶检测的可行性。方法:手术暴露裸鼠肝门静脉,经肝门静脉注射C6胶质瘤细胞至36只裸鼠肝脏,分别于注射胶质瘤后的7 d、14 d和21 d随机抽取建模裸鼠12只行3.0T MRI扫描,之后取建模裸鼠肝脏组织对其进行大体形态学观察、HE染色,比较3种方法对肿瘤转移灶的检出能力以及所测肿瘤结节大小的差异,并使用S100beta进行免疫组学染色。结果:MRI影像学对肿瘤转移灶的检出时间要晚于HE染色(Wald χ2=5.01,P=0.025),而较大体标本改变出现时间无差异(Wald χ2=0.03,P=0.853);且14 d与21 d时MRI所测肿瘤结节直径与HE染色以及大体标本所见肿瘤结节直径之间亦有差异(F14 d=14.28,P=0.000;F21 d=1 123.23,P=0.000)。组织切片S100beta免疫组化结果证实肝脏肿瘤结节为C6胶质瘤。且肿瘤转移灶在MRI T2WI上呈高信号改变,对较大肿瘤结节3.0T MRI能显示其内细节及瘤周水肿。结论:该方法可成功构建胶质瘤血行肝脏转移模型;且3.0T MRI可用于该模型鼠肿瘤转移灶的检测。
2015, 40(9):1215-1217.
摘要:目的:检测急性淋巴细胞白血病细胞(acute lymphoblastic leukemia,ALL)CCRF-CEM和Raji细胞中Beta-抑制蛋白1(Beta-Arrestin1)与Zeste增强子同源物-2蛋白(enhancer of Zeste homolog 2,EZH2)是否存在结合。方法:白血病细胞中,Western blot检测Beta-Arrestin1与EZH2表达水平,激光共聚焦(Confocal)检测 Beta-Arrestin1与EZH2在细胞中的位置与共定位;免疫共沉淀(CO-IP)检测Beta-Arrestin1与EZH2结合能力。结果:Beta-Arrestin1与EZH2在白血病K562、CCRF-CEM和Raji细胞中均有表达。激光共聚焦结果显示Beta-Arrestin1与EZH2均在K562、CCRF-CEM和Raji细胞内共定位,CO-IP结果显示在K562,CCRF-CEM和Raji细胞中Beta-Arrestin1与EZH2结合。结论:在CCRF-CEM和Raji中,Beta-Arrestin1可与EZH2结合。
2015, 40(9):1218-1222.
摘要:目的:探讨锌对尿毒症血清诱导的血管内皮细胞氧化应激的保护作用及可能机制。方法:收集尿毒症患者及健康正常人血清,以15%的血清浓度作用于血管内皮细胞。分为4组进行实验:正常血清组(N)、尿毒症血清组(U)、尿毒症血清+10 ?滋mol/L硫酸锌组(U+10)、尿毒症血清+30 ?滋mol/L硫酸锌组(U+30)。 荧光素 DCFH-DA 探针法测定细胞内活性氧含量,采用总抗氧化能力检测试剂盒检测细胞总抗氧化能力,实时荧光定量PCR检测细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸:醌氧化还原酶1(nicotinamide adenine dinucleotidephosphate:quinone oxidoreductase 1,NQO-1)及诱导Ⅰ型血红素氧合酶(heme oxyge-nase,HO-1)mRNA的表达,蛋白印迹检测细胞NQO-1、HO-1及核因子E2相关因子2(nucleus factor-E2 related factor 2,Nrf2)的表达。结果:与N组比较,U组内皮细胞的总抗氧化能力明显降低(N vs. U:452.8±19.5 vs. 321.4±27.8,P<0.001),活性氧水平升高(22.9±2.7 vs. 75.1±11.2,P<0.001);而锌干预处理(U+10和U+30)则增加了细胞总抗氧化能力(U vs. U+10 vs. U+30:321.4±27.8 vs. 455.7±16.0 vs. 462.9±18.6,均有P<0.001),减少了活性氧产生(75.1±11.2 vs. 45.2±7.6 vs. 49.3±8.3,P<0.001);同时,尿毒症血清组及锌干预组NQO-1、HO-1 mRNA及蛋白表达增高(NQO-1蛋白:N vs. U vs. U+10:0.40±0.05 vs. 0.65±0.07 vs. 1.09±0.08;HO-1蛋白:0.21±0.07 vs. 0.47±0.08 vs. 1.09±0.11,P<0.05),且锌干预组较尿毒症血清组增加更明显(P<0.05);锌干预组细胞核Nrf-2表达较正常血清组及尿毒症血清组增加(N vs. U vs. U+10 vs. U+30:0.23±0.07 vs. 0.25±0.07 vs. 0.65±0.07 vs. 0.69±0.06,均有P<0.001);但上述指标在不同浓度的锌处理组间均无统计学差异。结论:锌可能通过促进Nrf-2核转位,增加抗氧化酶NQO-1及HO-1表达,进而增加血管内皮细胞的总抗氧化能力和削弱尿毒症血清诱导的氧化应激反应。
2015, 40(9):1223-1227.
摘要:目的:研究基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)/肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)融合蛋白介导的骨髓间充质干细胞(bone marrow derived stroma cell,BMSCs)对造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)增殖和趋化能力的影响,以期望通过联合移植的方式重建肝组织。方法:培养鉴定3~4周龄SD大鼠BMSCs及大鼠HSCs。荧光显微镜下观测重组腺病毒pAD-SDF-1-(GlySer)3-HGF-IRES-GFP感染BMSCs 1、3、7、14 d后的感染效率,同时ELISA检测SDF-1和HGF的表达。制备BMSCs细胞滋养层,HSCs种植于有滋养层的 24 孔板中,分为3组:HSCs加培养基组(A1组);HSCs加BMSCs组(B1组);HSCs加SDF/HGF融合蛋白介导的BMSCs组(C1组),检测共培养1、3、7、14 d后HSCs的增殖倍数。利用transwell培养体系,按实验要求分为3组:HSCs加细胞培养液组(A2组);HSCs加BMSCs组( B2组); HSCs加SDF/HGF融合蛋白介导的BMSCs(C2组),测定HSCs的迁移指数。结果:重组腺病毒pAD-SDF-1-(GlySer)3-HGF-IRES-GFP感染BMSCs 1、3、7、14 d的感染效率分别为(25.28±3.72)%、(82.22±3.58)%、(64.85±4.48)%、(28.35±2.73)%,感染后第3天的感染效率最高(与第1、7、14天相比较,F=718.05,P=0.000;F=66.80,P=0.000;F=642.78,P=0.000)。重组腺病毒pAD-SDF-1-(GlySer)3-HGF-IRES-GFP感染BMSCs 1、3、7、14 d后,SDF-1的表达分别为:(1.02±0.15) μg/ml,(4.51±0.52) μg/ml,(2.18±0.19) μg/ml,(1.22±0.21) μg/ml;HGF的表达分别为:(1.38±0.32) ug/ml,(5.01±0.43) μg/ml,(3.10±0.26) μg/ml,(1.63±0.27) μg/ml。感染后第3天SDF-1与第1、7、14天比较和HGF与第1、7、14天比较的表达明显增高(P均=0.000)。BMSCs和HSCs共培养第3、7、14天,B1组、C1组中HSCs的扩增倍数明显高于A1组(P均=0.000)。同时C1组中HSCs的扩增倍数明显高于B1组(P均=0.000)。transwell显示B2、C2组的迁移指数明显高于A2组,同时C2组的迁移指数明显高于B2组。结论:SDF-1/HGF融合蛋白介导的BMSCs 可能在促进HSCs的增殖及趋化方面起到重要作用。
2015, 40(9):1228-1231.
摘要:目的:探讨KCNJ2基因下游rs312691与rs623011 这2位点是否为中国大陆甲状腺毒症周期性瘫痪(thyrotoxic periodic paralysis,TPP)患者可疑致病位点。方法:对TPP组112人,不伴低钾周瘫的Graves’甲亢(GD组)127人,正常对照组(NC组)94人提取全基因组DNA以及PCR扩增,于目标位点进行单向测序。结果:rs312691等位基因C在TPP组的基因频率为0.674,显著高于GD组0.40和NC组0.463,CC基因型的甲亢男性和正常男性相较CT和TT基因型发生TPP的风险分别为5.390倍和2.481倍;rs623011等位基因A在TPP组的基因频率也为0.674,显著高于GD组0.386和NC组0.431,AA基因型的甲亢男性和正常男性相较AG基因型和GG基因型发生TPP的风险分别为5.292倍和3.236倍。结论:rs312691与rs623011均与中国大陆TPP显著相关,可能为TPP致病位点。
刘 星,马东明,诸 波,查克岚,陈俞瑾,郑舒展,蔡毅华,杨 悠,范忠才
2015, 40(9):1232-1235.
摘要:目的:观察一氧化氮(nitric oxide,NO)气体信号通路体系对他汀类降脂药物阿托伐他汀钙的抗动脉粥样硬化作用的影响。方法:雄性SD大鼠60只随机分为:正常对照组(Control组),高脂饮食组(HF组),阿托伐他汀钙(atorvastatin,ATV)组(ATV组),阿托伐他汀钙+ N’-硝基-L-精氨酸甲酯盐酸盐(N’-nitro-L-arginie methyl ester,L-NAME)组(ATV+ L-NAME组)。在给予高脂饮食后,继续ATV和ATV联合L-NAME各治疗13~15周。观察主动脉弓的病理变化;测定各组血脂水平;测量NO、总一氧化氮合酶(total-nitric oxide synthase,T-NOS)活力、内皮性一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)以及eNOS的信使核糖核酸(eNOSmRNA)水平。结果:与Control组相比,HF组及ATV+L-NAME组大鼠主动脉弓均出现显著的动脉粥样硬化病理损害,HF组血脂水平变化明显(P<0.05),血清NO、eNOS水平、T-NOS活力及降主动脉eNOSmRNA表达水平明显下降(P<0.05)。与HF组比较,ATV组主动脉粥样硬化病变较轻,血脂含量明显下降(P<0.05),血清NO、eNOS水平、T-NOS活力以及降主动脉eNOSmRNA表达水平明显增高(P<0.05)。与对照及ATV组别比较,ATV+L-NAME组大鼠血脂均升高明显(P<0.05),而血清 NO、eNOS含量及T-NOS活力均明显下降(P<0.05)。结论:ATV提高了大鼠血清NO体系的含量和活性,阻断大鼠NO通路后使ATV的抗动脉粥样硬化作用明显减弱。
2015, 40(9):1236-1239.
摘要:目的:尝试采用磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)监测磁标记树突状细胞(dendritic cell,DC)归巢引流淋巴结。方法:DC由小鼠骨髓细胞经诱导分化获得。探针为烷基化低分子量聚乙烯亚胺(PEI2k)包裹的超顺磁性氧化铁(super-paramagnetic iron oxide,SPIO)纳米颗粒,标记方法为成熟DC与探针共孵育过夜。收集细胞,行标记效果、细胞分子表型分析。将标记的成熟DC注入小鼠足底,行不同时间点MRI,观察DC归巢淋巴结,72 h后,取腘窝淋巴结送病理检查。结果:DC纯度高达90%。普鲁士兰染色和激光共聚焦成像显示探针位于细胞内。流式细胞术(fluorescence activated cell sorting,FACS)分析表明,标记过程对DC的成熟表型无明显影响。体内MRI和淋巴结病理显示,24 h后标记DC在淋巴结内聚集。结论:采用N-alkyl-PEI2k/SPIO纳米探针标记DC后,MRI可以清楚地监测其在体内归巢淋巴结的情况。
2015, 40(9):1240-1244.
摘要:目的:在体外研究细胞毒性化疗药物表柔比星对乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)复制水平的影响。方法:3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法检测0、0.1、0.5、1.0 μmol/L不同浓度表柔比星对HBV稳定细胞系HepG2.2.15细胞和HepG2-HBV1.1细胞活力的影响。将药物直接添加在HepG2.2.15细胞和HepG2-HBV1.1细胞中,提取细胞内及上清中的HBV复制中间体,通过real-time PCR法和southern-blot法检测HBV DNA拷贝量。结果:HepG2.2.15细胞分别经0、0.1、0.2、0.5 μmol/L表柔比星处理后,细胞内HBV病毒拷贝量(×106)分别是3.53±0.26、5.39±0.23、9.40±0.92、19.07±1.47,各组间有统计学差异(F=10.984,P=0.005)。同样,HepG2-HBV1.1细胞也分别经0、0.1、0.2、0.5 μmol/L表柔比星处理后,细胞内HBV病毒拷贝量(×106)分别是2.80±0.37、5.14±0.49、14.24±1.29、26.59±1.98,各组间有统计学差异(F=13.122,P=0.003)。Southern-blot检测表明HepG2.2.15细胞内HBV DNA复制中间体相对量在对照组(0 μmol/L表柔比星)和处理组(0.5 μmol/L表柔比星)中分别为(1.00±0.01)和(1.53±0.05),对照组和药物处理组比较有统计学差异(t=19.202,P=0.002)。同样,HepG2-HBV1.1细胞内HBV DNA复制中间体相对量,在对照组和处理组中分别为1.01±0.02、3.12±0.20,对照组和药物处理组比较有统计学差异(t=18.034,P=0.003)。上述结果提示表柔比星促进细胞内HBV的复制。HepG2.2.15细胞分别经0、0.1、0.2、0.5 μmol/L表柔比星处理后,细胞上清液中HBV病毒拷贝量(×106)分别是2.37± 0.22、3.50±0.27、6.02±0.56、17.74±0.96,各组间有统计学差异(F=20.726,P=0.001)。同样,HepG2-HBV1.1细胞也分别经0、0.1、0.2、0.5 μmol/L表柔比星处理后,细胞上清液中HBV病毒拷贝量(×106)分别是3.75±0.35、6.05±0.48、10.28±1.01、20.86±1.81,各组间有统计学差异(F=14.761,P=0.002)。Southern-blot检测表明HepG2.2.15细胞上清中HBV DNA复制中间体相对量,在对照组和药物处理组中分别为1.08±0.02和2.69±0.05,对照组和药物处理组比较有统计学差异(t=58.33,P=0.000)。同样,HepG2-HBV1.1细胞内HBV DNA复制中间体相对量,在对照组和药物处理组中分别为1.03±0.01、3.52±0.05,对照组和药物处理组比较有统计学差异(t=85.801,P=0.000)。该结果提示表柔比星促进细胞分泌或释放更多的HBV到细胞上清液中。结论:表柔比星有直接的促HBV复制的作用,该作用可能成为化疗后HBV再激活的新机制。
2015, 40(9):1245-1249.
摘要:目的:探讨支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)患儿肺炎时的心肺功能特征,以便对预后不良的患儿早期干预,从而改善生存率。方法:对2012年1月至2013年6月在深圳市儿童医院随访的BPD伴发肺炎(观察组),未并发肺炎正常随访BPD(对照1组)和健康婴幼儿(对照2组)进行心肺功能检测。心功能检测采用彩色多普勒超声诊断仪进行,以三尖瓣返流速度≥3 m/s或/和室间隔向左偏移和右心室扩张判断为肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH);肺功能检测采用Power-Cube超声流量仪进行。结果:①心功能:观察组(n=30)中有40%伴发PH,而对照1组(n=28)和对照2组(n=20)未有PH。观察组的收缩期肺动脉压力(systolic pulmonary artery pressure,sPAP)比对照1组、对照2组高[(32.33±2.30) vs. (22.16±3.71)和(20.51±2.30) mmHg,P<0.001];观察组的肺血管阻力(pulmonary vascular resistance,PVR)比对照1组、对照2组的高[(2.32±0.34) vs. (2.13±0.29)和(1.71±0.24)wood unit,P<0.001]。对照1组的PVR比对照2组高(P<0.001);观察组的肺动脉瓣血流加速时间(acceleration time,AT)、右心室射血时间(right ventricular ejection time,RVET)均比对照1组、对照2组低[(55.20±6.15) vs. (59.95±5.73)和(67.94±6.60) ms,(197.24±18.77) vs. (211.29±19.07)和(223.91±19.59) ms,P<0.001];PH组的sPAP、PVR比非PH组的高[(42.39±1.57) vs. (25.63±5.48),(2.58±0.24) vs. (2.16±0.29),P<0.001];PH组的AT、RVET均比非PH组低(P<0.001)。②肺功能:观察组的呼吸频率(respiratory rate,RR)比对照1组、对照2组均高[(57.43±4.21) vs. (52.36±3.69)和(28.10±2.32)次/分,P<0.001],观察组的达峰时间比(Tpef/Te)、达峰容积比(Vpef/Ve)、75%潮气量时的呼气流速(TEF75)、25%潮气量时的呼气流速(TEF25)、25%潮气量时呼气流速/呼气峰流速(25/PF)均比对照1组、对照2组低(均P<0.001);PH组的RR与非PH组的RR相比,没有差异(P=0.69);PH组的Tpef/Te、Vpef/Ve、TEF75、TEF25、25/PF比非PH组低(均P<0.05)。结论:对BPD患儿肺炎时监测心肺功能,有利于了解患儿的心肺功能受损程度,同时可以早期发现PH,可能在一定程度上减少病死率。
2015, 40(9):1250-1254.
摘要:目的:评价缬沙坦氨氯地平单片复方制剂对原发性高血压伴稳定型心绞痛患者(stable angina pectoris,SAP)的有效性和安全性。方法:将符合条件的122例患者随机分为A组(60例)和B组(62例),A组给予缬沙坦氨氯地平片进行治疗,B组给予缬沙坦氢氯噻嗪片治疗,疗程均为6周。在治疗前后对两组病例的血压、运动平板实验结果、静息心电图、SAP发作状况进行监测同时观察药物不良反应及其依从性。结果:A组治疗后降压疗效优于B组(A组VS. B组,P=0.000;P=0.035)。治疗后运动平板实验结果(P=0.001,P=0.034,P=0.000,P=0.000,P=0.029,P=0.000)、静息心电图改善状况评价(P=0.000)和冠脉事件发作状况(P=0.000),A组与B组相比差异有统计学意义。不良反应监测(P=0.585)及药物依从性评价(P=0.768),A组与B组相比差异无统计学意义。结论:缬沙坦氨氯地平单片复方制剂在更好的实现平稳降压的同时,还能对SAP进行有效遏制,其药物安全性和依从性与其他一线降压药物无差异。
2015, 40(9):1255-1259.
摘要:目的:从围术期麻醉管理角度分析儿童先天性心脏病介入治疗术中不良事件和麻醉管理安全性关系,试图提出相应的预防措施和建议。方法:回顾性分析不同麻醉方法(静脉全麻、喉罩静吸复合全麻和气管插管全麻)下1 792例介入治疗术中出现不良事件的类型、发生率、死亡原因及处理等。对可以预知的麻醉高危因素加以强化管理,降低麻醉相关不良事件。结果:麻醉相关因素引起的不良事件发生率为3.63%(65/1792),经及时处理后好转,不影响患儿预后。手术相关不良事件发生率为2.40%(43/1792),其中死亡4例,总死亡率为0.22%。3种麻醉方法中静脉全麻组不良事件发生率最高(12.6%,P=0.000),且危险性高。结论:术前根据患儿不同的病情和生理状况,选择合适的麻醉管理方案,对可以预知的高危因素加以强化,制定合理的应急处理方案。有效的围术期监测及科室团结协作可以降低先心病介入治疗术中不良事件的发生率。
2015, 40(9):1260-1263.
摘要:目的:通过观察高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)治疗胎盘植入患者的临床疗效及不良反应,评价超声消融治疗胎盘植入中的安全性及有效性。方法:将15例诊断为胎盘植入的患者进行高强度聚焦超声治疗,于治疗前后分别行六氟化硫微泡造影,以评价胎盘植入部位血供情况,术后1周用彩色多普勒超声评价植入胎盘面积变化、血HCG水平及月经恢复情况。结果:15例患者术后立即行六氟化硫微泡造影,其中14例患者未见明显血流信号,1例仍有部分血流信号,即刻治疗有效率达93.3%,治疗后1周有效率达100%,治疗后3天14例血人体绒膜促性腺激素水平明显降低,1例下降不明显;另外9例月经来潮,其经期、经量、周期较孕前无统计学差别。结论:HIFU能安全有效治疗胎盘植入。
2015, 40(9):1264-1268.
摘要:目的:了解重庆地区体检人群慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的患病情况及危险因素对其的影响情况,为COPD的防治工作提出科学的建议。方法:对来我院健康体检的3000例30岁以上重庆地区人群广泛进行肺功能检查、体格检查、胸片及心电图检查,并填写COPD危险因素调查表,对筛查出的疑似COPD患者进一步到呼吸内科门诊进行确诊及治疗。结果:重庆地区40岁以上体检人群COPD患病率为10.10%,40岁以下体检人群(30~39岁)COPD患病率为2.88%,其差异具有统计学意义( χ2=39.104,P=0.000)。多因素logistic回归分析显示,高龄、吸烟、特殊职业暴露史、家族史是COPD的独立危险因素,OR值均>1,其差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:重庆地区40岁以上体检人群COPD患病率较高,应提高肺功能早期筛查COPD重要性的认识,对有吸烟、特殊职业暴露史、家族史等危险因素的人群,应尽早行肺功能检查,并加强健康宣教及危险因素的防范,有助于提高COPD的早期诊治率,减少致残、致死率。
2015, 40(9):1269-1272.
摘要:目的:探讨集束化干预方案对护养中心空巢老人抑郁倾向的影响。方法:对54例空巢老人实施集束化干预方案,并在干预前后采用老年抑郁量表(geriatric depression scale,GDS)进行评估。结果:干预前空巢老人的抑郁情绪检出率为22.22%,干预后空巢老人抑郁情绪检出率为7.41%(P=0.021);干预后GDS得分有统计学差异(P=0.000),其中高分段和中分段老人GDS得分在干预后明显降低(P=0.000),低分段差异不明显(P=0.061)。结论:养老机构空巢老人抑郁情绪较常见,集束化干预方案能显著降低其发生率和抑郁倾向,且尤其对GDS得分中高分段老人干预效果好。
2015, 40(9):1273-1274.
摘要:
主管单位 :重庆市教育委员会
主办单位 :重庆医科大学
编辑部 :《重庆医科大学学报》编辑部
主编:黄爱龙
编辑部主任 :唐秋姗
国际标准刊号:ISSN 0253-3626
国内统一刊号:CN 50-1046/R