摘要:目的：构建SH3结构域结合蛋白4（SH3-domain binding protein 4，SH3BP4）重组腺病毒载体及shSH3BP4慢病毒载体，初步探索SH3BP4对肝癌细胞迁移增殖能力的影响。方法：PCR扩增SH3BP4 cDNA序列并构建腺病毒重组质粒pAdEasy-SH3BP4，HEK293细胞包装重组腺病毒AdSH3BP4；构建SH3BP4基因短发夹型RNA干扰慢病毒载体，转染至HEK293T细胞，包装重组慢病毒shSH3BP4。采用Western blot检测SH3BP4在人正常肝脏细胞及肝癌细胞的内源性表达，将SH3BP4过表达实验部分设为3个组：Mock组、AdGFP组和AdSH3BP4组，Mock组为空白对照组，AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组，AdSH3BP4组为感染腺病毒AdSH3BP4的实验组；将SH3BP4敲低实验部分设为2个组：shControl组和shSH3BP4组，shControl组为感染慢病毒shPLL3.7的对照组，shSH3BP4组为感染慢病毒shSH3BP4的实验组。通过Transwell和划痕实验检测SH3BP4过表达和敲低对肝癌细胞迁移能力的影响；MTS和直接克隆形成实验检测SH3BP4过表达和敲低对肝癌细胞的增殖能力的影响。结果：经限制性内切酶酶切及DNA测序验证，成功构建AdSH3BP4重组腺病毒载体和shSH3BP4慢病毒载体。Transwell结果表明，AdSH3BP4组（74.800±0.544）相较于空白对照组（219.467±2.640）与AdGFP组（210.533±8.498），迁移的细胞数明显减少（P=0.000）；而shSH3BP4组（191.467±3.906））比shControl组（91.733±2.763）细胞的迁移数目明显增加（P=0.000）。划痕实验结果表明，AdSH3BP4组的细胞修复率[（10.400±0.036）%]明显低于空白对照组[（37.500±0.063）%]与AdGFP组[（50.000±0.063）%]（P=0.000）；而shSH3BP4组[（55.00±0.05）%]明显高于shControl组[（23.3±0.029）%]（P=0.000）。MTS结果表明：AdSH3BP4组在96 h的吸光度值（0.921±0.053）与空白对照组（1.091±0.043）及AdGFP组（1.062±0.024）相比明显降低（P=0.005）。shSH3BP4组在96 h的吸光度值（1.497±0.020）与shControl对照组（1.142±0.103）相比明显升高（P=0.004）。直接克隆形成实验结果表明，AdSH3BP4组的细胞克隆形成数（34.333±2.082）相较于空白对照组（86.333±4.726）与AdGFP组（87.333±1.528）明显减少（P=0.000），而shSH3BP4组（65.000±6.557）却明显高于shControl组（31.000±2.000）（P=0.001）。上述实验结果说明SH3BP4过表达能显著抑制肝癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力，而SH3BP4敲低能明显促进肝癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力。结论：SH3BP4可抑制肝癌细胞迁移、侵袭和增殖，可能为肝癌的诊治提供一个新的靶标。

摘要:目的：构建编码磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶（phosphoenolpyruvate carboxykinase，PEPCK）的基因PCK1重组腺病毒和基因敲除2种细胞模型，并初步观察PCK1过表达和敲除后对肝癌细胞迁移能力的影响。方法：PCK1 cDNA克隆到pAdTrack-TO4载体，构建重组腺病毒质粒，在HEK293细胞中包装、扩增成高滴度重组腺病毒AdPCK1；利用CRISPR/Cas9系统在PLC/PRF/5肝癌细胞系中筛选出PCK1基因敲除的稳定细胞株。首先，在过表达模型将Huh7细胞设为2组：AdGFP组和AdPCK1组，AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组，AdPCK1组为感染腺病毒AdPCK1的实验组。在敲除模型设Parental组和KO组，Parental组是PLC/PRF/5细胞作为对照组，KO组是PCK1基因敲除稳定细胞株作为实验组。Western blot技术检测2种模型蛋白表达量，采用划痕实验观察细胞迁移能力，进一步经qRT-PCR检测影响肝癌细胞的迁移关键分子。结果：重组腺病毒AdPCK1构建成功，经Western blot鉴定PCK1在Huh7细胞中的表达。向导RNA（single guide RNA，sgRNA）寡核苷酸双链成功插入酶切后的LentiCRISPR-V2质粒载体中且测序正确；经Western blot鉴定PCK1敲除的细胞株筛选成功。划痕结果显示，PCK1过表达模型在48 h的细胞迁移率为（66.300±0.383）%，与AdGFP组[（42.900±3.833）%]相比明显增加（t=10.540，P=0.000）；PCK1敲除KO组在48 h的细胞迁移率为（59.40±5.68）%，与亲本细胞组[（79.00±5.20）%]相比明显减少（t=4.420，P=0.012）。qRT-PCR结果显示，PCK1过表达后，相较于对照组AdGFP，Cdh1相对表达量为2.733±0.501（t=5.989，P=0.004），相对表达增高；PCK1敲除后，相较于亲本细胞组，Cdh1相对表达量为0.664±0.017（t=34.290，P=0.000），相对表达减少。结论：PCK1过表达后可明显抑制肝癌细胞的迁移能力，而敲除后促进其迁移，证实PCK1可能作为抑癌基因参与肝癌的发生和发展。

摘要:目的：主要研究乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）感染肝细胞后，细胞周期激酶2（cyclin-dependent kinase 2，CDK2）调控宿主限制性因子SAMHD1（sterile alpha motif and histidine/aspartic acid domain-containing protein 1）磷酸化的分子机制。方法：利用siRNA干扰技术，特异性处理肝癌细胞Huh7.0的对照组、干扰CDK1组和干扰CDK2组，分别用Southern blot检测这3组中乙肝病毒复制的变化，Western blot检测这3组中SAMHD1磷酸化水平的变化，流式细胞仪检测这3组中细胞周期的变化；进一步通过免疫共沉淀技术鉴定肝癌细胞中CDK2激酶和SAMHD1的相互作用。结果：在肝癌细胞Huh7.0中，与对照组相比，干扰CDK1 组和干扰CDK2组的细胞周期明显有差异，分别停滞在G2期（P=0.001）或G1期（P=0.001）。Western blot结果表明，干扰CDK2后，宿主限制性因子SAMHD1磷酸化水平下降48%，Southern blot结果表明病毒复制水平降低57%（P=0.003），而干扰CDK1后病毒复制水平没有明显变化（P=0.325）进一步通过免疫共沉淀发现在肝癌细胞Huh7.0中，CDK2激酶可与SAMHD1发生相互作用，并且相互作用发生在细胞核内。结论：HBV感染肝细胞后，募集CDK2调控宿主限制性因子SAMHD1的磷酸化，拮抗其抗病毒作用。

摘要:目的：研究转化生长因子-β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）激活小鼠肝星状细胞（mouse hepatic stellate cells，mHSC）的具体机制。方法：实验选用mHSC-T25细胞株为实验对象，随机分为激活组（mHSC-T25+10 ng/mL TGF-β1）、抑制组（mHSC-T25+1 μmol/L TGF-β-R1抑制剂）和对照组（mHSC-T25）。qRT-PCR检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、TGF-β1、转化生长因子β受体1（transforming growth factorβreceptor1，TGF-β-R1）、Jagged1、血管内皮生长因子（vas－cular endothelial growth factor，VEGF）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）等的mRNA表达；细胞免疫荧光法检测α-SMA、Jagged1等蛋白的表达；Western blot检测TGF-β1、α-SMA、TGF-β-R1、Jagged1、Smad2/3、p-Smad2/3等蛋白的表达。结果：①TGF-β1刺激组中α-SMA、TGF-β1、TGF-β-R1、Jagged1、VEGF、HGF等mRNA表达量均较对照组明显增加而抑制组均明显下降。α-SMA：激活组（315.1±6.2）%，抑制组（34.3±4.5）% （F=3291.956，P=0.000）；TGF-β1：激活组（524.8±14.3）%，抑制组 （29.0±10.7）%（F=469.534，P=0.000）；TGF-β-R1：激活组（235.5±15.2）%，抑制组（17.0±2.8）%（F=392.239，P=0.000）；Jagged1：激活组（548.7±16.6）%，抑制组（17.4±4.7）%（F=364.166，P=0.000）；VEGF：激活组（331.9±19.8）%，抑制组（19.5±3.7）%（F=278.407，P=0.000）；HGF：激活组（376.00±6.51）%，抑制组（16.2±2.7）%（F=640.340，P=0.000）。②激活组高表达α-SMA、Jagged1等蛋白，而对照组、抑制组表达明显较少。α-SMA：激活组0.880±0.016，对照组0.481±0.007，抑制组0.207±0.014 （F=2098.556，P=0.000）；Jagged1：激活组0.796±0.015，对照组0.474±0.021，抑制组0.167±0.005（F=1242.556，P=0.000）。③TGF-β1激活组中TGF-β1、α-SMA、TGF-β-R1、Jagged1、Smad2/3、p-Smad2/3的蛋白表达量均较对照组明显上调而抑制组均明显下调。TGF-β1：激活组1.180±0.138，对照组0.654±0.061，抑制组0.359±0.012（F=67.706，P=0.000）；α-SMA：激活组1.076±0.063，对照组0.689±0.022，抑制组0.374±0.011（F=239.186，P=0.000）；TGF-β-R1：激活组1.192±0.142，对照组0.710±0.380，抑制组0.378±0.069 （F=57.235，P=0.000）；Jagged1：激活组1.582±0.247，对照组0.817±0.116，抑制组0.364±0.059（F=43.649，P=0.000）；Smad2/3：激活组2.057±0.114，对照组1.203±0.105，抑制组0.664±0.063（F=158.856，P=0.000）；p-Smad2/3：激活组2.088±0.120，对照组1.168±0.107，抑制组0.573±0.120 （F=136.369，P=0.000）。上述实验结果提示，激活组、抑制组与对照组比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：TGF-β1通过Jagged1/Notch激活小鼠肝星状细胞并调控其相关生物学活性。

摘要:目的：探究干扰素在Huh7.5.1细胞中对RNA编辑酶（adenosine deaminases acting on RNA 1，ADAR1）表达的影响，以及ADAR1对丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）复制的调控作用。方法：干扰素（IFN-α，30 IU/mL）刺激Huh7.5.1细胞后，利用real-time PCR和Western blot检测ADAR1表达水平的变化，同时HCV以一定滴度（0.2 MOI）感染Huh7.5.1细胞，观察IFN-α对HCV复制的影响；利用siRNA降低ADAR1表达，过表达质粒（ADAR1 p110和p150）增加ADAR1表达，并进一步利用基因编辑技术建立ADAR1稳定敲除细胞株，明确ADAR1与HCV的复制关系。结果：IFN-α诱导Huh7.5.1细胞ADAR1 p150表达（48 h：t=10.400，P=0.007；72 h：t=19.390，P=0.002），而不影响ADAR1 p110表达（48 h：t=0.806，P=0.472；72 h：t=1.929，P=0.133），同时IFN-α可显著抑制HCV复制（48 h：t=10.170，P=0.001；72 h：t=35.810，P=0.000）。ADAR1 p110和p150过表达48 h后，HCV病毒核酸和蛋白水平均明显低于空白对照（P=0.004，P=0.015）；ADAR1 siRNA干扰后，HCV复制增加了2倍以上，差异显著（t=13.530，P=0.000）；利用Crispr-cas9技术敲除掉Huh7.5.1中的ADAR1后，HCV复制也明显增加（t=5.259，P=0.023）；ADAR1干扰后IFN-α仍然存在对HCV明显的抑制作用（t=9.146，P=0.001）。结论：IFN诱导蛋白ADAR1可以抑制HCV复制，且ADAR1部分介导了IFN-α对HCV复制的抑制。

摘要:目的：探讨乙肝病毒X区基因（hepatitis B virus X gene，HBV-X）变异情况与慢性乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）感染患者血清中转化生长因子-β1（transforming growth factor beta 1，TGF-β1）表达致肝细胞肝癌间的相关性。方法：收集2015年1月至2016年10月期间重庆医科大学附属第二医院的慢性乙型病毒性肝炎患者血清35例，肝硬化35例，肝癌35例。采用聚合酶链反应方法（polymerase chain reaction，PCR）扩增HBV-X基因序列，并对其产物行DNA测序，将测序结果与已知HBV-X基因序列对比分析变异位点。酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测患者血清中TGF-β1浓度。将结果进行卡方检验、单因素方差分析等方法处理数据。结果：TGF-β1浓度在肝癌组表达明显高于非肝癌组，差异具有统计学意义（P<0.05）。肝病患者血清中常见的突变位点依次为：A1762T/G1764A、T1719C、G1635A、A1605G、C1653T、T1753G，其中A1605G、A1762T/G1764A、T1753G突变率在肝癌组明显高于非肝癌组，差异具有统计学意义（P<0.05）。采用t检验对两者进行分析发现，3个位点突变与不突变组的TGF-β1浓度存在统计学差异。结论：HBV-X基因中的T1753G、A1605G、A1762T/G1764A位点突变可能与TGF-β1表达及肝癌的发生相关，这可能参与了肝癌疾病发展进程。

摘要:目的：为了进一步探讨DEPDC1（DEP domain containing 1）在肿瘤发生发展中的作用。DEPDC1是近年发现的一个肿瘤相关基因，前期研究结果显示其在鼻咽癌细胞周期及癌变过程中具有作用。方法：利用qRT-PCR和免疫组织化学染色分别检测DEPDC1在18例新鲜样品和44例组织芯片肿瘤患者中的表达情况。人鼻咽癌细胞系CNE-1稳定沉默DEPDC1后，流式细胞检测细胞增殖并利用Transwell小室分析侵袭迁移情况。结果： DEPDC1在鼻咽癌组织中表达量（0.699±0.521）明显高于正常组织（0.408±0.183），差异有统计学意义（P＜0.05）。DEPDC1稳定沉默后，CCK8检测结果表明 CNE-1细胞增殖速度减慢。流式细胞检测的结果显示，G1期细胞减少，G2/M期细胞增多，细胞周期进程受阻。划痕及Transwell实验结果表明，DEPDC1稳定沉默明显减弱了CNE-1细胞运动，侵袭及迁移能力（77.033±5.183 vs. 20.137±2.828， 107.336±5.033 vs. 26.326±1.414），差异均有统计学意义（P＜0.05）。进一步定量qRT-PCR及Western blot检测发现，DEPDC1稳定沉默导致上皮细胞标志分子E-cad－herin（0.457±0.022）显著上调、而间质细胞标志分子Vimentin（0.780±0.063）、N-cadherin（0.780±0.063）以及EMT上游关键转录因子Twist1（0.710±0.034）下调（P＜0.05）。结论：本研究成功构建了DEPDC1稳定沉默细胞株，与前期siRNA介导的瞬时沉默相似的是，发现DEPDC1稳定沉默可抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭迁移，并改变EMT关键分子的表达，为进一步探索DEPDC1在鼻咽癌中的作用机制奠定了基础。

摘要:目的：探讨微小RNA-20b（microRNA-20b/miR-20b）是否直接靶向低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）信使RNA的3’-非编码区（3’-untranslated region，3’-UTR）调控其基因表达。方法：采用TargetScan和miRanda算法预测HIF-1α 3’-UTR区是否存在miR-20b的配对序列；构建并鉴定表达HIF-1α 3’-UTR的双荧光素酶基因报告系统（pmiR-RB-ReportTM-HIF-1α 3’-UTR），将重组质粒（recombinant plasmid，RP）与mimics-miR-20b（M）或NC-miR-20b（N）共转染HeLa细胞，本研究共分为RP、RP+M、RP+N、P、P+M和P+N六组，24 h后检测各组双荧光素酶活性的比值。结果：HIF-1α 3’-UTR区存在miR-20b配对区域；成功构建了含HIF-1α 3’-UTR序列的双荧光素酶基因报告载体；重组质粒与mimics-miR-20b共转染的HeLa细胞荧光素酶活性明显低于其他对照组（P=0.022）。结论：miR-20b可以直接靶向结合HIF-1α 3’-UTR区负向调控其表达。

摘要:目的：PRR11（proline rich protein 11）是近年来发现的一个肿瘤相关基因，前期研究结果显示其高表达对于肺癌等恶性肿瘤细胞的侵袭迁移具有重要作用，本研究为了更进一步研究其促进肺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法：综合利用siRNA敲减、划痕及迁移实验、Western blot及免疫荧光等方法分析人肺癌细胞系A549沉默PRR11表达后细胞侵袭迁移能力下降的分子机制。结果：PRR11沉默后，划痕及Transwell实验结果表明，PRR11沉默明显减弱了A549细胞运动、侵袭及迁移能力。进一步定量qRT-PCR及Western blot检测发现，PRR11稳定沉默导致上皮细胞标志分子E-cadherin明显上调、而EMT上游关键转录因子Twist1及间质细胞标志分子N-cadherin表达下调，另外免疫荧光染色结果同样显示Twist1及N-cadherin下调明显。结论：肺癌细胞系A549中PRR11可能通过调节Twist1等EMT关键分子的表达在细胞侵袭转移过程中起关键作用，为进一步探索PRR11在肺癌中的作用机制奠定了基础。

摘要:目的：探讨Toll样受体9（Toll-like receptor 9，TLR9）在中波紫外线（ultraviolet B，UVB）诱导的人永生化角质形成细胞（human immortal keratinocyte，HaCaT）光老化模型中对下游信号分子的调控作用。方法：实验分为3组：正常对照组、模型组、A151组。正常对照组予以假照射处理，模型组予以辐照剂量30 mJ/cm2 UVB照射处理，A151组予以辐照剂量30 mJ/cm2 UVB照射并加用TLR9抑制剂进行干预处理。使用衰老相关β半乳糖苷酶法观察细胞衰老。CCK-8法检测细胞增殖。Western blot检测TLR9、磷酸化核转录因子（phospho nucler factor-κB，pNF-κB）蛋白表达。RT-PCR法检测细胞肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）mRNA转录水平。结果：Western blot结果显示模型组较正常对照组TLR9、pNF-κB蛋白表达量升高（P=0.000，P=0.000），A151组较模型组TLR9、pNF-κB蛋白表达量降低（P=0.010，P=0.000）。RT-PCR结果显示模型组较正常对照组TNF-α、IL-6mRNA转录水平上调（P=0.000，P=0.000），A151组较模型组TNF-α mRNA、IL-6 mRNA转录水平下调（P=0.000，P=0.030）。衰老相关β半乳糖苷酶染色结果显示模型组较正常对照组染色阳性细胞数增多（P=0.000），A151组较模型组染色阳性细胞数减少（P=0.000）。CCK-8结果显示模型组较正常对照组细胞增殖率降低（P=0.010），A151组较模型组细胞增殖率升高（P=0.045）。结论：UVB通过上调HaCaT中的TLR9表达，引起核转录因子磷酸化，促进细胞因子TNF-ɑ、IL-6转录水平升高，介导细胞炎性反应，从而降低细胞增殖率，诱导细胞衰老。

摘要:目的：探讨垂体促甲状腺激素（thyrotropin，TSH）瘤的不同临床表现，提高对垂体TSH瘤的认识，降低漏诊率和误诊率。方法：收集3例不同类型的垂体TSH瘤或可疑为垂体TSH瘤患者的临床特征、生化指标、影像学资料、免疫组化结果、手术方式和术后情况。结果：1例以甲状腺毒症和甲状腺肿大为首发症状及体征，2例以肿瘤占位效应为首发症状；2例甲状腺素水平升高，3例TSH均升高；3例垂体磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）均提示垂体大腺瘤；1例行“肿瘤切除术”，2例行“经鼻蝶窦垂体腺瘤切除术”；2例免疫组化TSH阳性；随访过程中2例术后出现“腺垂体功能减退症”，经过补充垂体激素治疗目前病情均较稳定。结论：经典的垂体TSH瘤临床较容易识别，但特殊类型的垂体TSH瘤比较容易漏诊或误诊，需要加强医务工作者对垂体TSH瘤各种临床表现的认识，针对各种类型的患者进行个体化诊治。

摘要:目的：研究REGγ基因促进人乳腺癌细胞株MDA-MB-231发生上皮-间充质转化的生物作用。方法：免疫组化检测乳腺癌组织、与癌旁组织REGγ的表达差异以及转移淋巴结中REGγ的表达水平。Western blot和RT-PCR检测不同人乳腺癌细胞系REGγ的表达差异。构建REGγ基因过表达和干扰载体并将其导入MDA-MB-231细胞中，然后用RT-PCR和细胞免疫荧光分别从转录水平和蛋白质水平检测上皮-间充质转化细胞标记物的表达水平的变化。分别通过划痕实验和Transwell证实REGγ对细胞侵袭迁移能力的影响。结果：免疫组化提示REGγ在乳腺癌组织（阳性表达率为88.57%）和转移淋巴结（阳性表达率为87.5%）中较癌旁组织（阳性表达率为0）明显高表达（ χ2=25.390，P=0.000； χ2=12.440，P=0.000）。MDA-MB-231细胞过表达REGγ后促进细胞发生上皮-间充质转化，使细胞侵袭能力增强（t=22.974，P=0.000）；干扰REGγ后抑制上皮-间充质转化，使细胞侵袭能力减弱（t=12.118，P=0.000）。结论：REGγ促进人乳腺癌MDA-MB-231细胞发生上皮-间充质转化，并促进肿瘤细胞侵袭转移。

摘要:目的：探讨窦镰旁巨大脑膜瘤切除术中临近术区及远隔部位硬膜外血肿形成的原因及处理方法。方法：回顾分析重庆医科大学附属第一医院神经外科2012年5月至2017年6月间行巨大脑膜瘤切除术前后或术后术区脑组织膨胀和远隔部位硬脑膜外血肿形成的5例患者的临床资料及原因。结果：本组患者术中出现术区脑组织膨出，脑压高或瘤体切除后脑压仍高表现，急行术中头颅B超提示术区或邻近部位出血或急诊头颅CT或术后立即复查CT提示硬膜外血肿形成。手术确认为硬膜外血肿形成。其中1例患者为明确术中远隔部位出血，另4例患者为术中明确为术区临近部位硬膜外血肿形成，术后明确为术区附近出血或伴远隔部位硬膜外出血。结论：窦镰旁巨大脑膜瘤切除术中、术后临近术区及远隔部位硬膜外出血发生率低，但十分危险。如能及时发现并处理，则预后良好。术中B超或术后复查CT有助于及时发现出血原因及部位，以免造成不必要的损伤。

摘要:目的：探讨卵巢癌结构域蛋白酶-1（ovarian tumor domain-containing protease-1，OTUD1）基因对人结肠癌细胞HCT116增殖和侵袭的作用及机制。方法：选取低表达OTUD1的人结肠癌细胞株，利用慢病毒包装技术过表达OTUD1基因，空载质粒作对照，嘌呤霉素筛选后构建稳定转染的结肠癌细胞株。RT-PCR（reverse transcription PCR）和Western blot技术检测转染效率。细胞迁移和侵袭实验检测2组细胞迁移和侵袭能力的改变。细胞增殖实验和流式细胞术检测2组细胞增殖能力的变化。克隆形成实验检测2组细胞的克隆形成能力。Western blot技术分析相关蛋白分子水平的变化，探讨其可能的机制。结果：6株结肠癌细胞株中HCT116细胞的OTUD1蛋白表达水平最低，并成功构建过表达OTUD1基因的结肠癌细胞株HCT116-OTUD1。与对照组HCT116-Control细胞相比，HCT116-OTUD1细胞株迁移（P=0.000）和侵袭能力减弱（P=0.000），CCK-8增殖实验显示实验组细胞增殖水平下降（P=0.004），EDU流式检测结果显示细胞增殖水平下降（P=0.000），克隆形成能力下降（P=0.017）。上皮间质转化（epithelial mesenchymal transition，EMT）相关分子E-cadherin表达水平上调，Vimentin表达水平下调，增殖相关信号通路分子p-AKT、p-ERK1/2表达水平下调。结论：过表达OTUD1可以通过减弱细胞的EMT作用来影响其迁移和侵袭能力，并抑制细胞的增殖能力，这种变化可能与MAPK/Erk和PI3K/Akt信号通路的激活受到抑制有关。

摘要:目的：探讨抑制同源盒A6（homeobox A6，HOXA6）的表达对HCT116结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法：构建重组干扰质粒（shRNA1，2，3，4-HOXA6）和阴性对照质粒（shRNA-NC），脂质体转染，荧光显微镜、RT-PCR和Western blot检测转染效率和表达情况。CCK-8法和克隆形成检测增殖，Transwell检测迁移和侵袭。Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达。结果：荧光显微镜显示各组转染效率均为30%左右；RT-PCR和Western blot结果显示各干扰组HOXA6 mRNA（P=0.003）和蛋白（P=0.000）的表达均低于shRNA-NC组，其中shRNA1-HOXA6组最低（P=0.000）。CCK-8结果显示shRNA1-HOXA6组的吸光度值明显低于shRNA-NC组（P=0.005）；克隆形成结果显示shRNA1-HOXA6组（132±45）克隆形成数较shRNA-NC组（353±45）明显减少（P=0.004）；Transwell迁移和侵袭实验显示shRNA1-HOXA6组[（134±28）、（60±4）]穿出细胞数较shRNA-NC组[（276±94）、（168±50）]明显减少（P=0.025、P=0.008）。Western blot实验显示shRNA1-HOXA6组E-cadherin（0.490±0.025）的表达较shRNA-NC组（0.326±0.032）明显升高（P=0.003），而N-cadherin（0.112±0.016）和Vimentin（0.886±0.033）较shRNA-NC组[（0.147±0.013）、（1.159±0.040）]明显降低（P=0.037、P=0.001）。结论：敲低HOXA6表达能显著抑制结直肠癌HCT116细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

摘要:目的：探讨血清CA125、HE4水平和绝经前ROMA值鉴别卵巢子宫内膜异位症及上皮性卵巢癌的临床应用价值。方法：收集2013年8月至2014年9月因发现附件区包块，收住入我院行手术治疗的患者共293例，其中上皮性良性卵巢肿瘤（EOB）患者61例（绝经前35例），卵巢子宫内膜异位症（OEM）患者151例（绝经前149例），上皮性卵巢癌（EOC）患者81例（绝经前41例）。术前2~5 d抽取静脉血，化学发光法测定血清中CA125与HE4水平，用卵巢癌风险评估软件计算ROMA指数。结果：（1）OEM组年龄（中位年龄32岁）明显小于EOC组（中位年龄51岁）（P=0.000），与EOB组差异不明显（P=0.500）。（2）绝经前EOC组的CA125高于EOB组与OEM组（P=0.000）。HE4和ROMA指数也高于OEM及EOB组，差异均有统计学意义（P=0.000），二者在EOB组与OEM组间无明显差异（HE4：P=0.762，ROMA：P=0.389）。（3）早期EOC组与OEM组比较，绝经前CA125值无明显差异（P=0.861），其诊断EOC的敏感性为85.71％，特异性为20.13%；HE4和ROMA（标准截断值为7.4%）诊断敏感性、特异性，阳性预测值、阴性预测值分别为71.43%、97.32%、71.43%、97.32%和92.86%、83.89%、35.14%、99.21%。绘制CA125，HE4及ROMA诊断EOC的ROC曲线，曲线下面积分别为：0.798、0.921、0.919。根据约登指数选取最佳ROMA截断值11.65%时，诊断早期EOC的敏感性，特异性，阳性预测值，阴性预测值分别为92.86%、93.96%、59.1%、99.29%，诊断效能高于现有截断值7.4%。结论：提高绝经前ROMA截断值至11.65%可能更有助于鉴别早期上皮性卵巢癌和子宫内膜异位症。

摘要:目的：探讨KIAA1456对人卵巢癌细胞株HO-8910PM裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法：将15只裸鼠随机分成3组：空白组（PM组），阴性对照组[PM（NC）组]，实验组[PM（KIAA1456）组]。利用人卵巢癌细胞株HO8910PM及本课题组前期通过慢病毒介导建立的阴性对照组细胞株HO8910PM（NC）和过表达KIAA1456的细胞株HO8910PM（KIAA1456）分别在空白组、阴性对照组、实验组建立裸鼠皮下移植瘤，待成瘤成功后，分别用PBS缓冲液和携带针对随机无关序列（NC）的慢病毒液Lentivirus-NC（作为阴性对照，LV-NC），携带KIAA1456病毒液Lentivirus-KIAA1456（LV-KIAA1456）每隔4 d进行一次瘤内定点注射治疗至28 d处死裸鼠，绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率；采用实时荧光定量PCR和Western blot检测移植瘤组织中KI－AA1456的表达情况；免疫组化检测移植瘤中ki-67和PCNA的表达情况。结果：HO8910PM（KIAA1456）移植瘤组KIAA1456表达量明显高于阴性对照组和空白对照组（P=0.000）；28 d后处死裸鼠，HO8910PM（KIAA1456）组皮下移植瘤的体积明显小于阴性对照组和空白对照组（P=0.000），抑瘤效果明显；移植瘤组织中KIAA1456的表达上调，ki-67和PCNA表达明显下调。HO8910PM（KIAA1456）组移植瘤组织中ki-67和PCNA的表达明显低于阴性对照组和空白对照组，差异具有统计学意义（P=0.000）。结论：过表达KIAA1456基因对人上皮性卵巢癌细胞HO8910PM裸鼠皮下成瘤的生长具有抑制作用，有望成为卵巢癌基因治疗的新靶点。

摘要:目的：探讨高体质指数（body mass index，BMI）对胸腹腔镜下食管癌根治术患者术后早期并发症的影响。方法：回顾性分析重庆医科大学附属第一医院胸心外科2014年7至2017年7月期间施行胸腹腔镜下食管癌根治术的186例患者的临床资料。排除术前曾接受过辅助放化疗、合并有心肺基础疾病及糖尿病、术前低白蛋白血症（白蛋白＜35 g/L）、轻BMI（BMI＜18.5 kg/m2）、肺功能损害（FEV1/FVC＜70%）的患者。最终139例患者入组本研究，并根据BMI值分为正常BMI组（18.5 kg/m2≤BMI＜24 kg/m2，96例）和高BMI组（BMI≥24 kg/m2，43例）。统计分析比较2组患者手术时间及术后早期并发症的发生率。结果：2组患者在手术时间上并无统计学差异（t=-1.910，P=0.0583），高BMI组术后切口感染发生率高于正常BMI组，差异有统计学意义（22.86% vs. 7.87%， χ2=3.948，P＜0.05）。但2组间肺部并发症、吻合口瘘、心脏并发症及乳糜胸的发生率比较，差异均无统计学意义（χ2=0.026， χ2=0.033， χ2=0.598， χ2=0.008，均P＞0.05）。结论：高BMI患者胸腹腔镜下食管癌术后较正常BMI患者更易发生切口感染，而术后严重并发症的发生率2组无统计学差异。

摘要:目的：研究紧密连接蛋白-1（tight junction protein 1，CLDN1）在食管鳞癌细胞TE10中的生物学功能及机制。方法：体外构建CLDN1过表达病毒，按感染复数（multiplicity of infection，MOI）=20的比例感染食管鳞癌细胞TE10。通过蛋白质印迹（Western blot）检测CLDN1过表达效果。分别采用细胞增殖及毒性检测试剂（cell counting Kit-8，CCK-8）检测细胞增殖能力，肿瘤细胞迁移及侵袭实验（Transwell）检测细胞迁移及侵袭能力变化。通过基因芯片分析过表达CLDN1对TE10基因表达谱的影响，分析下游靶基因并通过Western blot和回复实验研究CLDN1对MMP1的表达调控。结果：与NC组相比，过表达组TE10细胞中基质金属蛋白酶1（matrix metallopeptidase-1，MMP1）蛋白表达为（2.68±0.10），明显升高（P<0.05）；CCK-8实验结果表明，过表达组细胞在24、48、72 h时的吸光度明显高于阴性对照组（P<0.05）；迁移实验结果显示过表达组TE-10细胞迁移细胞数明显高于阴性对照组[（54.8±3.4） vs. （24.6±2.1）]；侵袭实验结果显示，过表达组TE-10细胞侵袭数目高于阴性对照组[（34.5±2.6） vs. （11.5±1.6）（P<0.05）。信使核糖核酸（messenger RNA，mRNA）芯片分析发现，过表达CLDN1后TE10细胞的MMP1基因表达明显升高（P<0.05），定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）及Western blot证实CLDN1能够促进MMP1的表达；功能回复实验结果显示，干扰MMP1能够抑制CLDN1对TE10细胞的增殖和侵袭转移能力的促进作用。结论：CLDN1可通过上调MMP1的表达促进食管鳞癌TE10细胞的增殖和侵袭转移，发挥癌基因的功能。

摘要:目的：探讨床旁纤支镜吸痰在肺癌术后患者快速康复中的作用。方法：纳入2014年1月至2015年12月期间符合研究条件的肺癌手术患者为研究对象，依据纤支镜吸痰组相同纳入条件，采用1∶1配对原则选择对照组，每组各100例。吸痰组术后采用纤支镜吸痰及物理治疗，对照组仅采用物理治疗。对比分析2组患者术后平均住院日、住院费用、肺部感染、白细胞、中性粒细胞比值、降钙素原（procalcitionin，PCT）情况。结果：与单纯物理治疗相比，纤支镜吸痰联合物理治疗可显著降低患者的术后平均住院日[（7.28±1.84） d vs. （8.07±1.83） d；P=0.010]、肺部感染（5/100 vs. 16/100；P=0.011）及住院费用（P=0.009）。纤支镜吸痰可以显著降低患者术后第3天的降钙素原水平（P=0.031）、术后第3和4天患者的体温、白细胞数（P<0.05）以及术后第3、4、5天的中性粒细胞比值（P<0.05）。结论：肺癌术后纤支镜吸痰可减少患者肺部感染、住院费用、住院时间，从而有利于患者快速康复。

摘要:目的：分析卵巢甲状腺肿的CT与MRI特点。方法：对经手术病理证实的8例卵巢甲状腺肿患者影像学特点进行回顾性分析。结果：8例卵巢甲状腺肿中，发生在左侧附件2例，右侧附件6例。其中5例行全腹部CT平扫及增强检查，均表现为囊实性肿块，2例可见钙化；增强扫描囊壁、分隔及实性部分明显强化，囊性部分无强化；行全腹部MRI平扫及增强扫描3例，均为囊实性肿块，实性部分在T1WI、T2WI均呈等信号，不同的囊腔信号不同，2例可见T2WI极低信号，在T1WI上呈等高信号。增强扫描囊壁、分隔及实质部分强化明显，囊液未见明显强化。结论：CT上出现“高密度囊”和MRI出现T2WI极低信号，是卵巢甲状腺肿的特征性表现。

摘要:细胞膜仿生纳米探针是一种新型探针，可通过EPR效应或分子靶标主动识别特定分子分型的肿瘤细胞，使肿瘤治疗从组织器官水平转向分子水平。同时，细胞膜纳米探针可减少机体内网状内皮系统的清除，体内循环时间亦明显延长。因此，其在肿瘤靶向精准治疗中显示出独特的优势。本文综述了几种典型的细胞膜仿生纳米探针在肿瘤靶向治疗方面的最新进展。

摘要:黄连-吴茱萸药对最早出现在宋朝时期，两者一苦一辛，一降一升，对消化系统具有良好的药理作用。现代研究表明，该药对对包括胃癌在内的多种肿瘤具有良好的抗肿瘤活性，但其有效物质基础与协同机制尚不明确。本文总结近10年文献，详细阐述了黄连-吴茱萸药对及其主要单体间的抗肿瘤机制和协同作用机制，文献研究发现该药对在治疗肿瘤与2型糖尿病靶点通路上的共通性。本综述为临床应用小檗碱与吴茱萸碱治疗肿瘤与2型糖尿病提供了新的思路，从信号通路角度讨论了小檗碱与吴茱萸碱协同抗肿瘤的作用机制，为临床抗肿瘤治疗奠定了理论基础。

摘要:食管癌发病率及死亡率一直位居全球恶性肿瘤前列，并且老年患者所占比例大。目前以手术为主的综合治疗是局部晚期食管癌主要治疗模式，然而老年患者生理储备功能下降，常合并多种慢性疾病，因此经常被临床试验排除在外，治疗的选择缺乏数据支持并存在争议。当前靶向治疗尚未取得令人满意的结果，但免疫治疗前景值得期待。当然，在关注治疗的同时，营养支持治疗也应得到更多注意。本文就老年局部晚期食管癌的研究进展进行综述，旨在为其治疗决策的选择提供参考。