主管单位 :重庆市教育委员会
主办单位 :重庆医科大学
编辑部 :《重庆医科大学学报》编辑部
主编:黄爱龙
编辑部主任 :唐秋姗
国际标准刊号:ISSN 0253-3626
国内统一刊号:CN 50-1046/R
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Wang Yueting,Zhang Xin,Zhao Jing
2019, 44(5):551.
摘要:目的:探讨大鼠缺血再灌注损伤中抑制糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)后对自噬的影响及如何通过酵母自噬启动ATG1激酶同源蛋白(Unc-51 like autophagy activating kinase 1,ULK1)影响自噬的机制。方法:实验选取SD大鼠为研究对象,分为假手术组(Sham 组,仅结扎颈内动脉)、缺血再灌注组(MCAO 组,大脑中动脉栓塞术制备局灶脑缺血再灌注模型)、GSK-3β干扰片段组(siGSK-3β组,建模前24 h注射GSK-3β干扰片段)、GSK-3β无意义序列组(ConsiGSK-3β组,建模前24 h注射无意义序列)、GSK-3β抑制剂组(SB216763组,建模前6 h注射抑制剂SB216763),每组5只。免疫印迹检测大脑皮质酪氨酸216号位点磷酸化GSK-3β[GSK-3β(P-tyr216)]、自噬相关蛋白轻链3抗体Ⅰ/Ⅱ(autophagy microtubule-as-sociated protein light chain 3 antibodyⅠ/Ⅱ,LC3BⅠ/Ⅱ)、泛素结合蛋白(sequestosome 1,P62)、磷酸化ULK1(phosphorylated ULK1,P-ULK1)、乙酰化ULK1(acetylated ULK1,AcK)的表达,电镜显示自噬体数量。结果:与Sham组比较,MCAO组中GSK-3β(P-tyr216)增高(P=0.000)。siGSK-3β、SB216763组相较MCAO组,LC3BⅡ/LC3BⅠ升高(P=0.000)、P62表达下降(P=0.000)、P-ULK1表达增高(P=0.000)、AcK表达下降(SB216763:P<0.05;siGSK-3β:P<0.01),电镜可见自噬小体。结论:在脑缺血再灌注损伤中,GSK-3β活性抑制后可通过磷酸化ULK1增强细胞自噬。
2019, 44(5):555.
摘要:目的:高效表达人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)重组蛋白并制备其多克隆及单克隆抗体。方法:人工合成经密码子优化的NGAL基因,构建原核表达重组质粒pW28-NGAL,IPTG诱导表达后分离纯化并分析在溶液中的聚集状态;获得的rhNGAL抗原免疫兔子制备多克隆抗体,免疫小鼠筛选高效价的特异性单克隆抗体并鉴定抗体亚型;Protein G亲合柱纯化,等温滴定量热法及非竞争ELISA法检测抗体的亲和力,SDS-PAGE分析纯度;最后运用Western blot、免疫荧光和免疫组化对抗体进行鉴定。结果:高效获得高纯度NGAL重组蛋白,主要以单体形式存在;成功制备兔多抗,同时筛选获得6株高效价单克隆抗体;其中,25号单抗为IgG1亚型,余者均属IgG2a亚型,且19、35号单抗的亲和常数分别为3.06×109、2.14×109。SDS-PAGE分析表明纯度均大于90%。进一步的鉴定结果表明制备的抗体皆具有良好免疫反应性及特异性,且单抗的特异性明显高于多抗。结论:本研究利用密码子优化技术高效表达制备了NGAL重组蛋白,获得了其高效价多克隆抗体和高特异性单克隆抗体,为NGAL的病理生理作用等功能研究提供了良好的实验材料,为NGAL临床免疫检测诊断试剂的国产化奠定了有力的基础。
2019, 44(5):561.
摘要:目的:探讨缺氧对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)生物学活性的影响。方法:选择第5代hPDLCs,在严重缺氧(1% O2)、轻度缺氧(5% O2)和常氧(21% O2)3种环境下培养,用MTT法评价细胞增殖率,用倒置显微镜观察细胞形态变化,细胞划痕试验评价细胞迁移能力,用免疫荧光染色染色研究细胞中低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)的表达及分布情况,用RT-PCR及Western blot检测HIF和IGF-1在不同氧浓度环境下的mRNA及蛋白表达水平。结果:①与正常hPDLCs相比,在1% O2浓度下,hPDLCs的数量在一个显微镜视野下明显减少,排列稀疏,结构发生改变。②hPDLCs的增长速率随着氧浓度的下降而减少,氧气浓度越低,增殖速率越慢。③在划痕处理后72 h,在3组不同氧浓度下,hPDLCs均向划痕区域迁移,但严重缺氧组的移动速率明显小于轻度缺氧和常氧组(划痕72 h:1% O2组0.917±0.023,5% O2组0.742±0.046,21% O2组0.453±0.039,F=530.237,P=0.002)。④HIF/DAPI染色结果显示在常氧条件下,HIF-1主要表达在细胞质中,随着氧气浓度降低,HIF逐渐转移至细胞核内。结论:缺氧能够抑制人牙周膜细胞的增殖和迁移能力,改变hPDLCs的形态。在缺氧条件下,HIF从细胞质转移到细胞核中,HIF和IGF-1的表达增加,提示缺氧微环境对人牙周膜细胞的生物学活性有一定影响。
2019, 44(5):568.
摘要:目的:探讨阿霉素肾病小鼠肾脏局部Th17/Treg免疫平衡的变化及泼尼松对该模型肾脏局部Th17/Treg免疫平衡的影响。方法:6~8周龄健康雄性BALb/c小鼠,随机分为正常对照(Control)组、阿霉素肾病模型(adriamycin,ADR)组、低剂量泼尼松(prednisone,Pre)治疗[ADR+Pre(low)]组和高剂量泼尼松治疗[ADR+Pre(high)]组,两治疗组于建模第5周行泼尼松悬液灌胃(13.5 mg/kg和18 mg/kg,1次/d,共8周)。考马斯亮蓝法检测随机尿蛋白浓度;肌酐试剂盒检测随机尿肌酐浓度;肾脏组织病理HE染色及透射电镜观察肾脏病变情况;流式细胞术检测肾脏局部Th17和Treg细胞比例。结果:随建模时间进展,与Control组相比,ADR组逐渐由微小病变型肾病综合征(minimal change nephrotic syndrome,MCNS)进展为局灶节段肾小球硬化(focal seg-mental glomerulosclerosis,FSGS),随机尿蛋白/肌酐比值(random urinary protein-creatinine ratio,RUPCR)较对照组明显升高(均P=0.000),肾脏局部Th17明显升高(均P=0.000),Treg无明显差异,Th17/Treg逐渐失衡(均P=0.000);与ADR组相比,两泼尼松治疗组肾脏损伤均有不同程度的缓解,RUPCR均明显下降(均P<0.01),且ADR+Pre(high)组较ADR+Pre(low)组下降更为明显(P<0.05)。ADR+Pre(high)组较ADR组Th17明显下降(P<0.05),Treg无明显差异,Th17/Treg比值明显下降(均P<0.01)。结论:随阿霉素肾病小鼠肾脏Th17/Treg失衡加重,肾脏损害加重;而早期应用泼尼松治疗可通过下调肾脏局部Th17水平,延缓Th17/Treg失衡,进而发挥肾脏保护作用。
2019, 44(5):577.
摘要:目的:用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导大鼠急性肺损伤,探讨黄芩苷对大鼠肺泡液体清除的效应。方法:将SD大鼠分为空白对照组、LPS诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)组及ALI+黄芩苷预处理组。根据黄芩苷预处理浓度再分为10、50、100 mg/kg 3个亚组。经LPS及不同浓度黄芩苷作用不同时间(2、4、6 h)后,计算肺湿/干重(W/D)比值,放射免疫分析法测定大鼠肺组织中环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)水平,观察肺组织病理学改变,并测量肺泡液体清除率(alveolar fluid clearance,AFC)变化。每组或亚组各5只大鼠。结果:黄芩苷预处理后,ALI大鼠肺组织含水量[黄芩苷10 mg/kg组(7.94±1.14);黄芩苷50 mg/kg组(6.13±1.34);黄芩苷100 mg/kg组(5.38±1.43)]较模型组(9.88±1.53)明显减少(P<0.05),cAMP含量[黄芩苷10 mg/kg组(381.00±60.51) pmol/g;黄芩苷50 mg/kg组(493.40±63.93) pmol/g;黄芩苷100 mg/kg组(582.40±47.44) pmol/g]较模型组[(265.8±62.39) pmol/g]明显增加(P<0.05),两者结果均随着预处理黄芩苷的浓度增加而增加。ALI+黄芩苷组较ALI组肺间质水肿明显减轻,炎症细胞浸润明显减少。黄芩苷预处理组各时间点AFC明显高于ALI组,并随黄芩苷预处理浓度增加而增加(P<0.05),且大鼠肺组织内cAMP水平与AFC呈正相关(r=0.984,P=0.002)。但在加入阿米洛利后,各组AFC明显下降,且各组间无明显差异(P>0.05)。结论:黄芩苷能够改善ALI大鼠肺泡液体清除,其可能途径为增加细胞内cAMP水平从而调节上皮钠通道功能。
2019, 44(5):581.
摘要:目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和姜黄素(curcumin,Cur)对成骨细胞线粒体功能活性改变及凋亡的影响。方法:体外培养小鼠原代成骨细胞,并将细胞分为4组:无任何处理的对照组(N组);10 μmol/L姜黄素预处理2 h,使用正常培养基培养24 h组(Cur组);用1 mg/L LPS处理24 h组(LPS组);用10 μmol/L姜黄素预处理2 h,然后再用1 mg/L LPS处理成骨细胞24 h组(Cur +LPS组)。利用线粒体荧光探针测量线粒体活性氧的产生,检测线粒体氧化呼吸链酶活性、线粒体膜电位、细胞内ATP的合成及细胞凋亡情况。结果:在经过1 mg/L LPS刺激后,小鼠成骨细胞线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成为对照组的2.59倍;与对照组相比,LPS组氧化呼吸链酶Ⅰ活性降低21%,氧化呼吸链酶Ⅲ活性降低26%,氧化呼吸链酶Ⅳ活性降低28%;线粒体细胞膜电位降低32%,ATP合成量为(0.79±0.06) μmol/mg蛋白,细胞凋亡数目增加3.2倍;而Cur+LPS组较LPS组相比,小鼠成骨细胞内ROS水平降低(1.48±0.21 vs. 2.59±0.32,P=0.003),氧化呼吸链酶Ⅰ活性升高(0.98±0.02 vs. 0.79±0.03,P=0.000),氧化呼吸链酶Ⅲ活性升高(0.93±0.03 vs. 0.74±0.03,P=0.004),氧化呼吸链酶Ⅳ活性升高(0.92±0.05 vs. 0.72±0.02,P=0.009),线粒体膜电位增加(0.91±0.04 vs. 0.68±0.04,P=0.002),ATP合成量增加(1.53±0.05 vs. 0.79±0.06,P=0.000),细胞凋亡数目减少(1.67±0.42 vs. 5.33±0.80,P=0.002)。结论:姜黄素预处理组的成骨细胞线粒体功能得以明显改善,并且细胞凋亡数目明显减少,为姜黄素可能被进一步应用于临床治疗慢性牙周炎提供一定的实验依据。
2019, 44(5):588.
摘要:目的:探讨G蛋白信号调节因子2(regulators of G-protein signalling,RGS2)抑制大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)继发的炎症反应。方法:69只大鼠分为假手术组、ICH组、阴性对照慢病毒+ICH组、RGS2过表达慢病毒+ICH组和时间窗组,前4组各组12只SD大鼠,时间窗组下设normal、ICH6h、ICH12h、ICH24h、ICH48h、ICH72h和ICH7d,每小组各3只SD大鼠。基底节注射VⅡ型胶原酶,建立大鼠ICH模型,对大鼠ICH后3 d进行神经功能评分,干湿法检测脑含水量,采用Western blot和ELISA法测定血肿周围脑组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1,IL-1β)的含量,免疫荧光染色方法检测病灶周边髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)表达情况。结果:①RGS2在ICH后表达量从(0.579 2±0.019 8)开始升高,并且在术后12 h达到峰值(0.809 3±0.076 2),然后降低,术后7 d恢复正常(0.600 0±0.083 0)。②与ICH组脑含水量(0.804 7±0.003 4)和神经功能评分(11.570 0±2.070 0)相比,RGS2过表达慢病毒+ICH组在ICH术后3 d脑水肿明显减轻(0.794 0±0.001 5),神经功能评分明显改善(7.429 0±0.976 0)。③RGS2过表达慢病毒+ICH组术后3 d血肿周边TNF-α和IL-1β的表达(1.407±0.055、0.762±0.046)明显低于ICH组(1.743±0.179、0.917±0.085),RGS2过表达慢病毒+ICH组TNF-α和IL-1β的A值(32.92±1.13、32.84±1.08)低于ICH组A值(40.38±0.99、39.29±1.39)。④RGS2过表达慢病毒+ICH组大鼠病灶周边MPO的表达明显低于ICH组和阴性对照慢病毒+ICH组。结论:RGS2抑制大鼠脑出血后血肿周边区TNF-α、IL-1β和MPO表达,能减轻脑水肿,改善神经功能,抑制脑出血后的炎症反应。
2019, 44(5):592.
摘要:目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)1/2双重抑制剂OSI-027对高体积分数氧(高氧)致sprague-dawley(SD)幼鼠肺损伤及纤维化的抑制作用。方法:72只3周龄SD幼鼠随机分为空气+生理盐水、高氧+生理盐水、高氧+雷帕霉素和高氧+OSI-027组,分别建立动物模型(各组n=18)。高氧干预采用90%氧气持续处理,生理盐水、雷帕霉素、OSI-027干预分别于观察期第1、3、6、8、10、13天经腹腔注射给药,在造模第3、7、14天取各组幼鼠测量体质量变化、肺湿干重比(wet/dry ratio,W/D)、肺组织病理学检查、肺损伤评分、肺泡间隔厚度测定、肺组织免疫组化和蛋白印迹检测mTOR及磷酸化核糖体S6蛋白激酶(pS6K1)蛋白在肺组织的分布和表达。结果:从时间因素看,各组幼鼠体质量(F时间=297.098,P=0.000)、mTOR免疫组化(F时间=379.978,P=0.000)、mTOR(F时间=166.991,P=0.000)和pS6K1(F时间=122.676,P=0.000)蛋白水平都随时间延长而增加。除空气组外,其余各组肺损伤评分(F时间=1410.362,P=0.000)、肺泡间隔厚度(F时间=356.312,P=0.000)、pS6K1免疫组化(F时间=57.992,P=0.000)都随时间延长而升高,肺W/D(F时间=28.915,P=0.000)第3、7天时升高,第14天时下降。从分组因素看,体质量(F分组=176.597,P=0.000)空气组明显高于其他组,肺W/D(F分组=28.484,P=0.000)和肺泡间隔厚度(F分组=296.223,P=0.000)空气组明显低于其他组,除第3天外,mTOR免疫组化(F分组=134.100,P=0.000)高氧组明显高于其他组,PS6K1免疫组化(F分组=234.697,P=0.000)、mTOR(F分组=59.377,P=0.000)和 PS6K1(F分组=101.837,P=0.000)蛋白印迹高氧组明显高于其他组,肺损伤评分(F分组=2 420.076,P=0.000)高氧雷帕组明显高于其他组,高氧OSI组明显低于高氧组和高氧雷帕组。结论:高浓度氧可激活肺组织mTOR信号途径;mTOR可能促进了高氧肺损伤纤维化的发生发展,其调控机制可能与抑制mTOR信号通路的活化有关。mTOR复合物1/2(mTORC1/2)双重抑制剂OSI-027能减轻高氧致SD幼鼠肺损伤及纤维化。
2019, 44(5):601.
摘要:目的:金诺芬对弓形虫速殖子的作用及对弓形虫感染小鼠的自噬初步探讨。方法:透射电子显微镜观察用药前后刚地弓形虫超微结构的变化;采用免疫荧光、免疫组化和免疫印迹法检测感染有弓形虫的脑组织中自噬蛋白LC3的变化。HE染色观察金诺芬作用前后小鼠脑部的弓形虫速殖子变化。结果:透射电镜显示10 ?滋g/mL组(B组)的弓形虫速殖子内部结构被破坏,虫体细胞膜破裂,细胞质均质样改变,20 ?滋g/mL组(C组)的虫体内容物溢出,线粒体及粗面内质网消失,核固缩,核膜断裂,细胞质出现许多空泡,严重者虫体崩解呈均质样改变。免疫荧光结果显示实验组(77.49±15.68)的LC3蛋白的表达量较对照组(53.81±15.24)明显增加(P=0.001)。免疫组化结果显示用药后(1 208.55±580.07)的LC3蛋白表达量比对照组(544.54±225.04)明显增高(P=0.000)。免疫印迹法检测结果显示用药后(41 738.52±0.00)的LC3蛋白表达量比对照组(25 383.88±607.34)明显增高(P=0.000)。用药后(218.80±21.17)寄生在小鼠脑部的弓形虫速殖子增殖数量明显少于对照组(495.40±31.91)(P=0.000)。结论:金诺芬在体外有破坏弓形虫速殖子的作用,同时金诺芬可以提高弓形虫感染小鼠的自噬水平从而抑制弓形虫增殖。
2019, 44(5):605.
摘要:目的:本研究通过多水平评价体系明确朱砂七是否可以拮抗耐药金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA),并探讨其发挥拮抗作用的免疫调节机制。方法:采用试管二倍稀释法进行药物敏感试验,观察药物对MRSA生长的抑制作用,再检测朱砂七是否影响金MRSA对宿主细胞的侵入,纤粘连蛋白粘附试验评价朱砂七对细菌粘附作用的影响。荧光定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)法检测朱砂七对AT-Ⅱ细胞模式识别受体Toll 样受体(Toll like receptor,TLRs)和胞质受体家族核苷结合寡聚结构域(nucleotide-binding oligomerization domain,NODs)及其下游炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)/白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)基因表达的影响。通过Western blot检测朱砂七对AT-Ⅱ细胞模式识别受体MAPK和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白表达水平的影响。结果:朱砂七组AT-Ⅱ细胞的MRSA侵入数量(471.57±34.32)明显低于模型组(1014.54±127.51,P<0.05)和阳性对照组(810.05±101.33,P<0.05)。朱砂七组MRSA感染AT-II细胞纤粘连蛋白吸附比例(0.25±0.01)明显低于模型组(1.04±0.12,P<0.05)和阳性对照组(0.74±0.07,P<0.05)。RT-PCR结果显示,MRSA可明显升高AT-Ⅱ细胞TLR2、NOD2及其下游炎性因子IL-6、TNF-α(P<0.05),朱砂七可降低其升高水平(P<0.05)。Western blot检测结果表明,朱砂七可以明显下调MAPK和NF-κB信号通路蛋白表达(P<0.05)。结论:朱砂七可以拮抗耐药金黄色葡萄球菌,该作用可能涉及MAPK和NF-κB信号通路,进而调控TLRs/NLRs模式识别受体及其下游炎性因子TNF-α/IL-6。
2019, 44(5):611.
摘要:目的:运用代谢组学的分析研究方法,对股骨头缺血性坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)患者尿液进行代谢轮廓分析,从而探索ONFH的分子机制及诊断性生物标志物。方法:运用高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱技术对26例ONFH患者的尿液(实验组)和26例正常人的尿液(对照组)进行检测,结合主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘法分析(OPLS_DA)对差异代谢物进行模式识别分析并观察组间差异。结果:实验组和对照组的代谢谱得到明显区分,发现并鉴定出28种与ONFH相关的差异代谢物,差异具有统计学意义(P<0.05),其中筛选出二丙基二硫化物、三甲基硒和氨基甲酸作为ONFH潜在的诊断性生物标志物;此外,嘌呤代谢、酪氨酸代谢、果糖和甘露糖代谢的紊乱可能与ONFH发生发展密切相关。生物信息学分析结果显示ONFH患者的骨骼发育、能量代谢、骨代谢、矿物质代谢、脂质代谢、脂质氧化、血管通透性和氧化应激均受到干扰。结论:基于高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联合多变量数据统计分析成功运用于ONFH尿液的代谢轮廓分析。
2019, 44(5):617.
摘要:目的:探讨大黄素对重症急性胰腺炎小鼠Treg/Th17平衡的影响及可能的机制。方法:将60只C57BL/6小鼠按照随机数表法分为3组:正常对照组(n=20)、模型对照组(n=20)和药物组(n=20),采用雨蛙素联合脂多糖法制备重症急性胰腺炎小鼠模型。模型构建成功后,药物组腹腔注射2.5 mg/(kg·d)大黄素,模型对照组和正常对照组均给予同等剂量的生理盐水。给药后48 h,将小鼠麻醉后处死。ELISA法检测血清中淀粉酶、脂肪酶、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平;流式细胞术法检测脾脏组织中调节性T细胞(regulatory T-cell,Treg)及辅助性Th17细胞(T helper cell 17,Th17)比例;q-PCR法检测脾脏组织叉头状/翼状螺旋转录因子3(forkhead or winged helix transcription,FOXP3)、视黄酸相关的孤儿受体γt(retinoid acid related orphan receptor gamma t,ROR γt)和Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)mRNA的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组血清脂肪酶、血清淀粉酶、TNF-α、DAO、IL-10水平及Foxp3、RORγt和TLR4 mRNA 表达量明显升高;Treg及Th17细胞数均升高,但Th17细胞上升比例高,Treg/Th17降低。与模型对照组比较,药物组血清脂肪酶、血清淀粉酶、TNF-α、DAO、IL-10水平及Foxp3、RORγt和TLR4 mRNA表达量明显降低。Treg及Th17细胞数均有所降低,Treg/Th17升高,均具有统计学意义(P<0.05)。结论:大黄素可明显降低TNF-α、DAO和IL-10的表达,缓解炎症应激和氧化应激反应,同时可调节Treg/Th17平衡,改善免疫紊乱,从而发挥治疗重症急性胰腺炎的作用。
2019, 44(5):622.
摘要:目的:探讨系统免疫炎症指数(systemic immune-inflammation index,SII)对脓毒症患者病情严重程度判断及预后评估的临床价值。方法:选择57名脓毒症患者为研究对象,患者按病情严重程度分为脓毒症组(30例)和脓毒性休克组(27例);根据28 d预后分为生存组(48例)和死亡组(9例)。记录患者入ICU时的SII、降钙素原(procalcitonin,PCT)、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ评分(acute physiology and chronic health evaluation Ⅱscore,APACHE Ⅱ)及序贯器官衰竭评分(sequential organ failure assessment,SOFA)。比较脓毒症组、脓毒性休克组间SII、血PCT、APACHE Ⅱ及SOFA的差异。Spearman法分析各指标间的相关性。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析SII、PCT、APACHE Ⅱ及SOFA对脓毒症患者预后评估的临床价值。结果:脓毒症组患者SII为[391.62(343.18,492.00)]×109/L,低于脓毒性休克组[1 454.17(689.96,2 467.52)]×109/L(P<0.05)。脓毒症组患者血PCT为[10.03(1.02,51.47)] ng/mL,脓毒性休克组[12.56(2.00,53.57)] ng/mL,两者没有统计学差异(P>0.05)。死亡组患者SⅡ、APACHE Ⅱ及SOFA均高于生存组(P<0.05);而血PCT水平在生存组和死亡组之间没有统计学差异(P>0.05)。Spearman相关分析分别分析SII与APACH Ⅱ、SOFA的相关性,SII与APACH Ⅱ进行相关性分析(r=0.628,P=0.001);脓毒症患者SII与SOFA进行相关性分析(r=0.638,P=0.001)。根据ROC曲线分析,SII的ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.914(P<0.05),PCT的AUC为0.519(P>0.05),APACHE Ⅱ与SOFA的AUC均为0.868(P<0.05)。SII其截断值0.743。结论:SII有助于早期对脓毒症患者进行病情严重程度的判断和预后评估。
2019, 44(5):627.
摘要:目的:探讨血清尿素(Urea)、肌酐(creatinine,Creat)、胱抑素C(cystatin C,CysC)、估算肾小球滤过率(estimated glomeru-lar filtration rate,eGFRCysC与c-aGFR)和补体组分1q(component 1q,C1q)检测在狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)诊断中的应用价值。方法:选取2017年3月至2017年12月在绵阳市中心医院就诊的系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematous,SLE)患者共560例,其中未累及肾脏患者339例(SLE组),LN活动期患者150例(LNA组),LN非活动期患者71例 (LNI组),另有360例健康个体作为对照(HC组)。测定血清Urea、Creat、Urea/Creat、CysC和C1q水平,并计算eGFRCysC与c-aGFR,以此评估这些指标对LN的诊断性能。结果:各观察指标在各组之间均有统计学差异(均P=0.000)。Spearman相关性分析显示,C1q与Creat(r=0.046,P=0.160)、Urea(r=0.011,P=0.748)、Urea/Creat(r=-0.011,P=0.743)无统计相关,与CysC(r=-0.183,P=0.000)、eGFRCysC(r=-0.183,P=0.000)和c-aGFR(r=-0.075,P=0.023)成负相关;CysC与Urea(r=0.309,P=0.000)和Creat(r=0.382,P=0.000)成正相关,与c-aGFR(r=-0.430,P=0.000)成负相关,与Urea/Creat(r=0.003,P=0.927)不相关。受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析显示,各观察指标单独对LN的诊断性能(area under curve,AUC)以eGFRCysC(0.891)CysC(0.890)为最大,其后依次为:C1q(0.804)、Urea(0.660)、Urea/Creat(0.630)、c-aGFR(0.547)和Creat(0.501)。C1q+CysC+c-aGFR联合检测即可达到最大诊断性能(AUC=0.962),其敏感度为89.3%,特异度为93.1%,YI=0.824。增加检测指标,不能改善诊断性能。结论:单独检测时,以CysC或eGFRCysC对LN的诊断性能最高,其次为C1q。联合检测以C1q +CysC+c-aGFR三项为最优,若出于经济考虑,C1q+CysC联合检测也可达到相近于最优的诊断性能。
2019, 44(5):633.
摘要:目的:观察复方阿替卡因(必兰)浸润麻醉在经鼻内镜辅助下鼻腔泪囊造口(endoscopic endonasal dacryocystorhinosto-my,EN-DCR)联合支架植入术中的效果。方法:采取前瞻性研究,选取需行经鼻内镜下左侧鼻腔泪囊造口术患者共69名,随机分为对照组30例以2%利多卡因浸润麻醉及实验组39例以复方阿替卡因行浸润麻醉,比较2组的麻醉显效率、术中疼痛程度和术前后心率血压及术中出血情况,采用卡方检验及独立样本t检验的方法进行统计分析。结果:实验组和对照组的疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale of pain,VASp)分别为(44.36±11.65) mm和(52.67±12.02) mm,2组间差异有统计学意义(t=2.897,P=0.005);2组患者术中出血量比较,实验组为(3.87±0.95) mL,对照组为(4.17±0.95) mL,差异有统计学意义(t=2.698,P=0.007);实验组麻醉显效率为89.74%,与对照组的76.67%相比差异无统计学意义(?字2=1.298,P=0.255)。术前、术后血压及心率的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:复方阿替卡因应用于经鼻内镜下鼻腔泪囊造口联合支架植入术中,效果可靠,是一种替代2%利多卡因浸润麻醉的改良局部麻醉药物。
2019, 44(5):638.
摘要:目的:探讨亚临床维生素A缺乏与重庆市及周边地区儿童生长痛的关系,为生长痛儿童临床治疗提供依据。方法:对我院2015年11月至2017年9月临床上已排除其他疾病,诊断为生长痛且症状持续6个月以上的111名患儿,采用高效液相色谱法测定静脉血维生素A含量。其中男性患儿53例,女性58例;年龄:2.4~12.3岁,平均 5.8岁。采用同样的方法检测了176例同期来我院健康体检儿童的维生素A含量,其中男100例,女76例;年龄2.1~13.1岁,平均4.8岁。结果:生长痛组111名中有70例(63.1%)为维生素A亚临床缺乏;体检组维生素A亚临床缺乏有87例(49.4%),比较2组数据差异有统计学意义(χ2=5.104,P<0.05)。结论:亚临床维生素A缺乏与重庆市及周边地区儿童生长痛存在相关性。
2019, 44(5):642.
摘要:目的:对重庆地区部分老年高血压患者进行现况调查,了解我市老年高血压患者患病情况、医疗情况和疾病管理情况。方法:采用描述性横断面调查研究,选取2016年2至6月在重庆医科大学附属第一医院老年科、心内科住院及青杠护养中心自理区入住的老年高血压患者共497例进行调查。结果:共收集有效问卷497例,血压达标率为55.73%。单因素分析时,年龄段、血压分级、饮酒史和就诊频率在血压达标组和未达标组之间差异有统计学意义。健康生活方式各指标完成率均在50%以上。高血压危险分层相关实验室检查基本项目及部分推荐项目阳性率高。仅24例调查对象(4.83%)为单纯高血压,473例调查对象(95.17%)有伴发疾病,最高伴发8种疾病。联合降压的调查对象有275例(55.33%),服用降压药种类最多为4种。结论:老年高血压患者存在多病共存、多重用药、治疗困难等特点,综合性医院应为老年高血压患者开设多学科诊治门诊,全面评估患者并制定合理完善的治疗方案。
2019, 44(5):649.
摘要:目的:探索儿童重症肺炎支原体肺炎伴肺不张治疗中支气管肺泡灌洗术(bronchoalveolar lavage,BAL)的不同治疗时机与胸片恢复的关系。方法:选取2017年1月至2018年2月期间于重庆医科大学附属儿童医院确诊的重症肺炎支原体肺炎伴肺不张的患儿作为研究对象,根据行支气管肺泡灌洗术时病程分为A组(≤10 d,55例)、B组(10~20 d,94例)、C组(≥21 d,66例)。分别于术后1周及术后1个月左右复查胸片,比较3组患儿肺不张吸收情况。结果:3组患儿术后1周随访胸片恢复情况比较:Kruskal-Wallis H检验:χ2=39.542,P=0.000。说明3组患儿术后1周随访胸片恢复情况存在统计学意义。进一步进行组间两两比较,A组与B组比较(PAB=0.026);A组与C组比较(PAC=0.000);B组与C组比较(PBC=0.000);说明3组患儿术后1周随访胸片吸收情况,A组优于C组,B组优于C组,A组及B组无明显差别。3组患儿术后1月随访胸片恢复情况比较:Kruskal-Wallis H检验:χ2=58.717,P=0.000。说明3组患儿术后1月胸片恢复情况存在统计学意义。进一步进行组间两两比较显示:A组与B组比较(PAB=0.01);A组与C组比较(PAC=0.000);B组与C组比较(PBC=0.000);组间两两比较均具有统计学意义,说明3组患儿术后1月随访胸片恢复情况均存在差异,吸收情况A组优于B、C组,B组优于C组。结论:对于重症肺炎支原体肺炎伴肺不张的患儿,BAL早期介入(10 d以内)有助于减轻病情、促进影像学恢复,从而改善预后。
陈巧莉,李竞宇,刘卫卫,张利宏,赵玲,李馥洁,裴莉,叶虹,黄国宁
2019, 44(5):653.
摘要:目的:研究体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)助孕中同步添加小剂量生长激素(growth hormone,GH)对胚胎质量及助孕结局的影响。方法:以2017年9月至2018年9月,前一周期IVF助孕未获优质胚胎且未获成功妊娠的76例年轻患者(<37岁)为研究对象,再次助孕采用与前一周期相同的促排卵方案,控制性超排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)期间同步添加小剂量生长激素,采用自身对照,比较患者前后两次助孕的Gn时间、获卵数、获可移植胚胎数、优胚率、子宫内膜厚度、临床妊娠率、着床率和生化/临床妊娠流产率等。结果:患者添加GH后,促排卵Gn用药总量、停Gn日血清雌二醇水平、停Gn日宫内膜厚度、获卵数、平均可移植胚胎数较前一周期均无统计学差异,无可移植胚胎周期取消率相似(P>0.05),但添加GH后Gn用药天数缩短[(10.39±1.38) d vs. (11.14±1.78) d,P=0.004],优质胚胎率(18.9% vs. 0.0%)、临床妊娠率[51.32%(39/76) vs. 7.89%(6/76)]、着床率[38.73%(55/142) vs. 5.00%(7/140)]均显著提高,差异有统计学意义(P<0.05),生化/临床妊娠流产率无统计学差异(P>0.05)。结论:无明确原因胚胎质量差的患者,再次IVF助孕同步添加小剂量GH,能获得理想的助孕结局。
2019, 44(5):657.
摘要:目的:白介素-22(interleukin-22,IL-22)是由T细胞和固有淋巴细胞产生的一种白介素-10(interleukin-10,IL-10)家族细胞因子,与炎症形成和肿瘤的发生密切相关。本研究旨在探讨IL-22基因多态性与中国人群结肠癌的关系。方法:采用病例对照研究的方法,收集结肠癌患者540例和健康对照组540例,用5’端核酸外切酶法分析IL-22基因3种常见多态性(-429 C/T、+1046 T/A和+1995A/C)。分类变量间的差异采用Pearson卡方检验,Student’s t检测连续变量间的差异。结果:结肠癌患者中IL-22-429 TT基因型出现频率明显增高(OR=1.69,95%CI=1.24~2.30,P=0.001),-429T等位基因(OR=1.35,95%CI=1.14~1.60,P=0.001)。此结果经过Bonferroni校正依然有统计学意义(P<0.017)。进一步分层研究后发现分化低的结肠癌患者相对于中高级别分化的结肠癌患者IL-22 -429 TT基因型频率较高(OR=1.45,95%CI=1.02~2.07,P=0.040),而-429 C/T基因多态性与结肠癌的部位、肿瘤大小、生长方式和TNM分期无关。IL-22+1046 T/A及IL-22+1995 A/C基因多态性与结肠癌无关(P=0.980,P=0.750)。结论:IL-22-429C/T基因多态性可能与结肠癌有关。
2019, 44(5):662.
摘要:目的:研究微小核糖核酸(MicroRNA,miRNA)221/222及其靶基因在正常孕妇和妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕妇胎盘中表达的差异,并通过细胞实验过表达方法研究miR-221/222对靶基因表达影响,探讨其在ICP发病机制中的作用。方法:搜集2015年9月到2016年3月在重庆医科大学附属第二医院妇产科行剖宫产分娩的正常孕妇和ICP孕妇的胎盘组织各20例,直接提取miRNA,采用实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测miR-221/222在2组胎盘组织中的表达情况;预测miR-221/222的靶基因是顶端钠依赖性胆酸转运体(apical sodium-dependent bile acid transporter,ASBT,又称SLC10A2);Western blot检测ASBT在ICP和正常胎盘组织中的表达情况;用Lipofectaine2000脂质体包裹合成的miR-221/222 mimic转染正常滋养细胞HTR-8;qRT-PCR检测miR-221/222表达水平;蛋白质印迹法检测转染后ASBT蛋白表达。结果:①经过内参U6的校正,miR-221在ICP胎盘表达量为1.066±0.044,正常胎盘表达量为0.053±0.009;miR-222在ICP胎盘表达量为13.724±4.355,正常胎盘表达量为0.833±0.189。可见miR-221/222在ICP胎盘中的表达明显上调(P<0.05)。②SLC10A2在ICP组中的表达量为0.328±0.102,在正常组中的表达量为0.604±0.119,其在ICP组的表达较正常组的表达下调(P=0.000)。③经过内参ACTIN校正,ASBT在转染miR-221组细胞内表达量为0.338±0.064,对照组表达量为0.583±0.040;ASBT在转染miR-222组细胞内表达量为0.371±0.024,对照组表达量为0.624±0.031,可见ASBT在转染组中较对照组表达下调。结论:miR-221/222在ICP胎盘组织中表达升高,而其预测靶基因ASBT的表达则下降;细胞实验中,miR-221/222转染组靶基因ASBT表达下降。两者之间可能存在负调控关系。可能由此影响了孕妇胆汁酸在肠道的重吸收及在肝脏的转运而导致妊娠期肝内胆汁淤积。
邓维,孙兴国,郭志勇,葛万刚,李浩,张也,董文涛,腾志涛,孙杏芸,于辉,费家玥,谢友红
2019, 44(5):668.
摘要:目的:探讨症状限制的极限心肺运动试验(cardiopulmonary exercise testing,CPET)在定量评估经皮冠状动脉腔内血管成形术(percutaneous coronary intervention,PCI)前后心肺功能中的临床应用价值。方法:利用CPET对12例正常人及12例冠脉造影术确诊冠心病拟行PCI的患者手术前后心肺功能分别定量评估,利用标准化分析对CPET指标进行解读;并在同期测定左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF),比较手术前后CPET指标的变化及与LVEF的相关性。结果:LVEF术前[(42.83±5.92)%]与术后[(45.08±4.76)%]比较,具有统计学差异(P<0.05);CPET核心指标峰值摄氧量、无氧阈值、峰值氧脉搏、摄氧效率平台、二氧化碳通气当量斜率、二氧化碳通气当量最低值、峰值负荷功率、递增功率运动时间正常对照组分别为(1.99±0.19) L/min、(1.22±0.19) L/min、(14.18±2.59) mL/次、(47.10±4.44)、(23.01±2.63)、(25.06±2.43)、(162±17.6) W、(6.47±0.80) min,术前组上述指标分别为(1.41±0.46) L/min、(0.87±0.23) L/min、(11.43±3.29) mL/次、(40.13±5.18)、(27.85±4.81)、(29.55±3.90)、(112.00±51.10) W、(5.28±1.81) min,术前组均低于正常对照组(P<0.05);术后组各指标分别为(1.59±0.33) L/min、(1.02±0.20) L/min、(12.37±2.72) mL/次、(39.20±5.60)、(26.93±2.88)、(29.30±2.82)、(132.00±31.70) W、(6.21±1.05) min,与术前比较,峰值摄氧量、无氧阈值、峰值氧脉搏、峰值负荷功率、递增功率运动时间均提高,具有统计学差异(P<0.05);摄氧效率平台、二氧化碳通气当量斜率、二氧化碳通气当量最低值与术前比较无统计学差异(P>0.05);CPET核心指标与LVEF呈高度相关(r值绝对值为0.579~0.908,均P<0.05)。结论:CPET的核心指标可用于无创定量监测PCI术前后心肺功能的变化情况,具有良好的临床应用价值。
邵岚,王大武,白定群,余和平,杜艳会,陈大为,李小宏,彭晓华,何佳,孔渝菡
2019, 44(5):674.
摘要:目的:探讨重庆医科大学附属第一医院康复医学科病房院内感染的病原学分布特点及相关因素分析。方法:通过查阅病史及“杏林医院感染实时监控系统”,收集2014年1月至2017年12月期间156名发生院内感染患者及1605名未发生院内感染患者的临床资料,对院内感染的病原菌分布及其影响因素进行回顾性分析。结果:研究期间康复医学科院内感染发生率为8.86%(2014:7.16%;2015:7.73%;2016:10.34%;2017:10.61%);共检测病原菌235株,检出革兰阴性菌(G-)178株(75.74%),革兰阳性菌(G+)49株(20.85%),真菌8株(3.40%)。G-中最常见的为大肠埃希菌(80株,34.04%),G+中最常见的为金黄色葡萄球菌(18株,7.66%);5种最常见的院内感染菌株中,多重耐药菌(multi-drug resistant bacteria,MDR)占比最高的为鲍曼不动杆菌(73.91%);感染部位最常见的为泌尿系统,占55.65%,其次为呼吸系统占20.87%,血液系统感染占8.70%;发生院内感染的疾病最常见的为脑卒中,占36.54%,在发生院内感染的所有病种中以脊髓损伤的院感发生率最高,为63.08%;男性(OR=2.105,95%CI=1.440~3.076,P=0.000)、留置尿管(OR=4.629,95%CI=3.087~6.942,P=0.000)、气管切开(OR=2.427,95%CI=1.293~4.557,P=0.006)以及日常生活活动能力(activity of daily living,ADL)得分<60分(OR=13.455,95%CI=7.585~23.869,P=0.000)为康复医学科院内感染的危险因素,而留置胃管(OR=0.312,95%CI=0.166~0.587,P=0.000)可能为保护性因素。结论:院内感染的细菌以革兰阴性菌为主,耐药菌比例较高,感染部位以泌尿系感染最常见。发生院内感染最常见的病种为脑卒中,而院感发生率最高的病种为脊髓损伤。男性、留置尿管、气管切开及ADL得分<60分等可能为院内感染的主要危险因素。
熊静,郝丽娟,林奕,雷 莉,孙文洁,徐冬梅,潘赢政,胡晓吟,杨霞,谭莉娜
2019, 44(5):679.
摘要:目的:探讨阴道斜隔综合征的合理诊疗方法。方法:对6例阴道斜隔综合征患者的临床资料进行回顾性分析。结果:6例患者中解剖分型Ⅱ型5例,Ⅲ型1例。6例患者均行B超检查。4例提示双子宫,2例提示完全性子宫纵隔。右侧阴道斜隔3例,左侧阴道斜隔3例。6例均合并斜隔侧肾缺如。3例行阴道斜隔切除术,3例行宫腹腔镜诊治+阴道斜隔切除术。2例术中诊断盆腔子宫内膜异位症,1例术中诊断盆腔炎及输卵管积液。3例术前痛经,术后痛经消失。3例有生育要求,其中2例术后自然受孕。结论:阴道斜隔综合征临床表现多样,易误诊漏诊。准确诊断该病是治疗的关键。阴道斜隔综合征最根本的治疗方式是斜隔切除引流。
2019, 44(5):683.
摘要:目的:对比分析传统切开复手术及腕关节镜微创手术治疗不稳定性桡骨远端骨折的临床疗效差异。方法:纳入2014年1月至2016年12月于我院接受治疗的86例不稳定性桡骨远端骨折患者为对象,按手术方案分组,观察组(41例)接受腕关节镜微创手术,对照组(45例)接受传统切开复位内固定手术。对比2组骨折愈合时间,治疗前及治疗3个月后掌倾角、尺偏角、桡骨短缩量、改良Sarmiento评分变化情况,末次随访时改良Gartland-Werley腕关节功能评分、腕关节活动度及并发症发生情况。结果:2组骨折愈合时间,治疗前及治疗3个月后掌倾角、尺偏角、桡骨短缩量、改良Sarmiento评分对比,差异均无统计学意义(P >0.05)。末次随访时,观察组腕关节功能优于对照组,腕关节各方向活动度均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。随访期间,观察组发生关节面不平整及(创伤性)关节炎者少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:腕关节镜微创手术治疗不稳定性桡骨远端骨折,可获得与传统切开复位手术相近的近期骨折复位效果,但在骨折愈合后腕关节功能恢复上更具有优势,推荐临床应用。
主管单位 :重庆市教育委员会
主办单位 :重庆医科大学
编辑部 :《重庆医科大学学报》编辑部
主编:黄爱龙
编辑部主任 :唐秋姗
国际标准刊号:ISSN 0253-3626
国内统一刊号:CN 50-1046/R