摘要:上颌窦底提升术是口腔种植领域中一种常用的骨增量手段。传统上颌窦底提升术应用的骨性替代材料存在供区损伤、免疫排斥、操作耗时及费用较高等问题。以自体血液制品及可注射生物材料为代表的新型充填材料具有成本较低、操作简便等优势，成为目前的研究热点并逐步应用于临床。近年有研究报道了在不植入任何骨性替代材料的前提下，仅提升上颌窦膜，同期行种植体植入术可获得手术成功。此外，为避免提升过程中侵入上颌窦腔带来的潜在风险，粗短植体及种植体斜行植入的方式也逐步得以应用。本文尝试从上颌窦底提升术的理论基础、影响因素、植入材料及替代治疗策略的选择等方面进行综述，以为后续研究及术者的临床抉择提供参考。

摘要:目的：探讨以脂肪来源的干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）为基础构建组织工程生物材料修复大鼠颅骨缺损的效果。方法：分离、培养ADSCs，并进行成骨、成脂、成软骨三系分化。制备壳聚糖多孔支架，扫描电镜观察接种ADSCs前后的微结构变化，以细胞活力试剂盒测试ADSCs接种于壳聚糖多孔支架后的细胞活力。取15只雄性Sprague Dawley（SD）大鼠予手术制备颅骨缺损模型，将缺损留空或植入壳聚糖支架，壳聚糖支架表面预先种植低密度（2.5×105）或高密度（1×106）ADSCs。术后8周收集样品用于微型计算机断层扫描分析，随后脱钙，石蜡包埋切片后行苏木素-伊红染色和免疫组化染色观察成骨指标骨涎蛋白。结果：ADSCs可以成功诱导成骨、成软骨和成脂肪分化；扫描电镜和细胞活力测试结果提示壳聚糖支架呈现多孔结构，ADSCs可黏附于支架并增殖，增殖效果与普通培养板相比无统计学差异。在大鼠颅骨缺损模型中，高密度ADSCs/壳聚糖支架组骨组织体积百分数分别比空白对照组和低密度ADSCs/壳聚糖支架组升高140.8%（P=0.014）和37.4%（P=0.036）。与空白缺损对照组相比，低密度ADSCs/壳聚糖支架组和高密度ADSCs/壳聚糖支架组骨密度分别升高29.4%（P=0.123）和64.1%（P=0.022）。组织学结果表明，骨缺损区新生骨组织的分布和数量与微型计算机断层扫描分析结果一致。成骨分化指标骨涎蛋白在高密度组表达有增高趋势。结论：高密度ADSCs复合壳聚糖支架可有效修复大鼠的颅骨缺损。

摘要:目的：探索前体形式———脑源性神经营养因子前体（precursor brain derived neurotrophic factor，proBDNF）对口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）SCC-4细胞迁移与侵袭能力的影响及其潜在机制。方法：对SCC-4细胞给予20 ng/mL proBDNF刺激后，通过Transwell迁移实验和划痕实验检测SCC-4细胞迁移，通过Transwell侵袭实验检测SCC-4细胞侵袭，通过qRT-PCR 和Western blot实验检测SCC-4细胞p75神经营养素受体（p75 neurotrophin receptor，p75NTR）mRNA与蛋白表达。进一步采用免疫荧光法观察proBDNF与p75NTR在SCC-4细胞的亚细胞定位。敲除p75NTR后，分别通过Transwell迁移实验、划痕实验、Transwell侵袭实验和qRT-PCR检测proBDNF对SCC-4细胞迁移、侵袭及促迁移侵袭相关基因表达的影响。结果：20 ng/mL proBDNF可明显促进SCC-4细胞迁移和侵袭（均P=0.000），且proBDNF与p75NTR在SCC-4细胞存在亚细胞共定位。proBDNF可促进SCC-4细胞p75NTR mRNA和蛋白表达（均P=0.000）。敲除p75NTR能逆转proBDNF引起的SCC-4细胞迁移、侵袭反应，以及降低结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）、波形蛋白（vimentin，VIM）、酪氨酸蛋白激酶受体UFO（anexelekto，AXL）、高迁移率族蛋白A2（high mobility group A2，HMGA2）、解整合素金属蛋白酶19（a disintegrin and metalloproteinase 19，ADAM19）、纤连蛋白富含亮氨酸跨膜蛋白2（fibronectin leucine-rich transmembrane protein 2，FLRT2）和磷酸二酯酶1C（phosphodiesterase 1C，PDE1C） mRNA表达水平（均P<0.05）。结论：proBDNF依赖上调p75NTR表达来促进SCC-4细胞迁移和侵袭，其机制可能为proBDNF结合p75NTR通过上调下游促迁移侵袭相关基因CTGF、VIM、AXL、HMGA2、ADAM19、FLRT2和PDE1C表达有关。

摘要:目的：评价3D数字化技术指导下的Le Fort Ⅰ和π型截骨术联合应用于矫治严重牙颌面畸形的临床疗效。方法：选取7例先天性发育性上颌骨牙弓不规则畸形成年患者。此项研究选用了12个测量指标（SNA、SNB、ANB、A-CP、B-CP、PG-CP、OP-FH、MP-FH、N-ANS、ANS-ME、NA-PA、SNPg）进行3D头模测量分析。将术前1周（T0）与术后3个月（T2）的3D头模测量数据（骨组织及软组织）进行对比分析。将所得的所有数据导入SPSS 21.0软件进行对比分析；术前1周（T0）、术后3个月（T2）间采取配对t检验；术前模拟（T1）、术后3个月（T2）间采用等效性检验。结果：本组7例患者，T0与T2测量结果显示，SNA、SNB、ANB、A-CP、B-CP、PG-CP、OP-FH、MP-FH、N-ANS、ANS-ME、NA-PA、SNPg、G-Sn-Pos、Cm-Sn-UL、A’UL-LLSi、LL-Si-Pos、UL-E plane、LL-E plane、Si-LLPos、H角、G-Sn、G-Ls、G-LL、G-Si、G-Pos的差异均有统计学意义（P<0.01）。T1与T2所有测量指标（SNA、SNB、ANB、A-CP、B-CP、PG-CP、OP-FH、MP-FH、N-ANS、ANS-ME、NA-PA、SNPg、上颌骨水平向位移误差、上颌骨垂直向位移误差、上颌骨前后向位移误差）双侧90%可信区间均在（-Δ，Δ）范围内，说明在3D数字化技术指导下，术后面部外形及口颌功能均达到术前设计的预测效果。结论：3D数字化技术指导下运用Le Fort Ⅰ型截骨术和π型截骨术联合矫正上颌骨复杂畸形是一种行之有效的治疗方法。

摘要:目的：观察单次玻璃体腔注射康柏西普治疗渗出型年龄相关性黄斑变性（neovascular age-related macular degeneration，nAMD），通过光学相干断层扫描（spectral-domain optical coherence tomography，SD-OCT）及多焦视网膜电图（multifocal elec－troretinogram，mf-ERG）了解视网膜解剖与视网膜功能的相关性，评价康柏西普治疗nAMD的短期疗效，探讨mf-ERG作为预测疗效及优化治疗方案的价值。方法：回顾性收集nAMD患者36例36只眼，均接受玻璃体腔注射康柏西普0.05 mL/0.5 mg一次的治疗，记录治疗前及治疗后1个月时的最佳矫正视力（best corrected visual acuity，BCVA）、视网膜黄斑中央厚度（central retinal macular thickness，CRT）、以黄斑为中心1、3、6 mm圆内RPE隆起的容积（1RV、3RV、6RV），mf-ERG中R1环P1波振幅密度、潜伏期等数据资料。统计学分析采用SPSS 22.0软件，2组计量资料的差异比较采用两配对样本t检验，采用Pearson相关性分析评价黄斑区功能与结构的相关性，检验水准α=0.05。结果：36例36只眼经康柏西普治疗后较治疗前，平均BCVA提高（0.19±0.16 vs. 0.26±0.17）；平均CRT下降[（472.14±181.53） μm vs. （389.5±124.79） μm]；平均1RV下降[（0.36±0.14） mm3 vs. （0.31±0.11） mm3]；平均3RV下降[（3.04±0.98） mm3 vs. （2.59±0.71） mm3]，平均6RV下降[（8.17±2.91） mm3 vs. （6.66±2.38） mm3]，差异均有统计学意义（P＜0.01）。P1波振幅密度与治疗前的（36.47±14.25） nv/deg2相比，增加至（47.21±13.13） nv/deg2，差异有统计学意义（P＜0.01），P1波潜伏期相比无明显改变[（38.13±9.75） ms vs. （39.21±9.62） ms]，差异无统计学意义（P＞0.05）。术前术后BCVA与CRT、1RV、3RV、6RV均呈显著负相关，与P1波振幅密度、潜伏期均呈显著正相关；术前术后CRT、3RV、6RV与P1波振幅密度均呈显著负相关，差异有统计学意义（P＜0.05）。3例3只眼在注射后出现结膜下出血，治疗后均恢复正常，所有患者随访期间未见严重眼部及全身并发症。结论：康柏西普治疗nAMD短期疗效确切，可提高患眼视力，恢复视网膜结构与功能，安全性高；BCVA、SD-OCT联合mf-ERG对于评价nAMD治疗效果更客观、更全面，mf-ERG有望成为nAMD治疗过程中评估疗效和判断再治疗的客观功能学指标。

摘要:目的：探讨早期玻璃体切割术治疗开放性眼外伤影响预后的因素。方法：回顾性分析早期行玻璃体切割术治疗的25例开放性眼外伤患者临床资料，研究内容包括患者就诊视力、预后视力、眼外伤类型、眼外伤分区、晶体损伤和(或)脱位、球内异物、玻璃体积血、视网膜脱离，以及上述因素对视力预后的影响。结果：25例研究对象中，Ⅰ区损伤10只眼，占40.0%，Ⅱ区损伤8只眼，占32.0%，Ⅲ区损伤7只眼，占28.0%；就诊视力≥0.05有11只眼，占44.0%；就诊视力＜0.05有14只眼，占56.0%；预后视力≥0.05有16只眼，占64.0%；预后视力＜0.05有9只眼，占36.0%；就诊视力（P=0.017）、外伤分区（P=0.013）、有无玻璃体积血（P=0.033）及视网膜脱离（P=0.008）是影响预后视力的重要因素。结论：开放性眼外伤患者经早期玻璃体切割术治疗后大部分可达到功能治愈和解剖治愈，就诊视力越好的患者手术疗效相对越好，伤口位于Ⅰ区的预后视力明显优于Ⅲ区，玻璃体积血、视网膜脱离会显著影响预后视力的恢复。

摘要:目的：探讨预劈核技术和常规拦截劈核技术在超声乳化白内障摘除手术的应用，对比其临床疗效及对角膜内皮细胞的影响。方法：选取蚌埠医学院第一附属医院2016年1月至2017年4月收集的60例（60眼）白内障患者进行研究，根据手术方法分为A组30例（30眼，采用预劈核技术行超声乳化白内障摘除手术）、B组30例（30眼，采用常规拦截劈核技术行超声乳化白内障摘除手术），观察2组患者手术疗效及角膜内皮细胞变化情况。结果：A组实际超声能量[（50.36±2.47）%]明显低于B组[（55.42±3.28）%]，A组有效超声时间[（56.56±10.20） s]明显低于B组[（67.79±11.45） s]，差异具有统计学意义（P＜0.05）。重复测量数据的方差分析显示，不同时间点的最佳矫正视力（best corrected visual acuity，BCVA）、角膜内皮细胞密度（endothelial cell density，ECD）和六角形细胞比例均有差别（P＜0.05），2组的BCVA、ECD和六角形细胞比例测量时间和组别不存在交互作用（P＞0.05）。术后1 d A组患者角膜水肿较B组轻，差异具有统计学意义（P＜0.05）；术后7 d 2组患者角膜水肿消退，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：2种手术方式均具有良好的临床疗效，采用预劈核技术能有效降低白内障术中超声能量和超声时间，降低角膜内皮细胞损伤，且操作方便，值得临床推广。

摘要:目的：构建稳定敲低人内皮细胞蛋白C受体（endothelial cell protein C receptor，EPCR）的人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs），检测敲低EPCR对hUC-MSCs向成纤维细胞分化能力的影响。方法：根据EPCR基因mRNA序列，合成3条小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）导入hUC-MSCs，通过检测EPCR蛋白表达筛选干扰效果最佳的siRNA。根据最佳siRNA序列构建慢病毒载体，包装重组慢病毒，感染hUC-MSCs，Real-time PCR和Western blot验证敲低效率。体外构建转化生长因子-β1（transforming growth factor beta1，TGF-β1）诱导hUC-MSCs向成纤维细胞分化模型，Real-time PCR和Western blot检测诱导前后α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）和Ⅰ型胶原（type Ⅰ collagen，Col Ⅰ）表达水平，以反映诱导效果。结果：以EPCR最佳siRNA序列构建EPCR基因RNAi慢病毒载体，成功敲低hUC-MSCs内EPCR的mRNA（t=28.86，P=0.000）和蛋白（t=88.60，P=0.000）表达水平。EPCR敲低后，hUC-MSCs合成的COL1A1和COL1A2在mRNA（P=0.044，P=0.000）和蛋白（P=0.000，P=0.000）水平减少。体外TGF-β1诱导可增加hUC-MSCs内α-SMA（F=369.713，P=0.000；F=451.060，P=0.000）、COL1A1（F=42.051，P=0.000；F=759.041，P=0.000）及COL1A2（F=359.205，P=0.000；F=764.348，P=0.000）在mRNA和蛋白水平的表达，促进其向成纤维细胞分化。但敲低EPCR，α-SMA（P=0.002，P=0.002）、COL1A1（P=0.002，P=0.000）及COL1A2（P=0.000，P=0.000）在mRNA和蛋白的升高水平明显降低。结论：成功获得EPCR稳定敲低的hUC-MSCs，证实敲低EPCR可减少hUC-MSCs内Col Ⅰ表达，并减弱其向成纤维细胞分化的能力。

摘要:目的：研究穿心莲内酯联合庆大霉素对烧伤创面感染的作用。方法：建立烧伤创面铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌混合感染小鼠模型，取BALB/c成年小鼠共48只，每只小鼠做4个烫伤创面，分为对照组、穿心莲内酯干预组、庆大霉素干预组及联合干预组（各组创面48个）。病理切片观察组织坏死情况，ELISA检测肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）及白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）水平，电镜观察生物膜情况；建立混合生物膜体外模型，Western blot检测上清及菌体中外毒素A（exotoxin A，ExoA）的表达；qPCR检测exoS及exoY表达水平。结果：电镜证实建模成功并显示各干预条件下生物膜破坏情况；病理评分显示，联合干预组（4.86±0.38）预后好于庆大霉素干预组（3.29±0.49）和穿心莲内酯干预组（4.14±0.69）（P=0.000，P=0.020）；ELISA示庆大霉素干预组、穿心莲内酯干预组、联合干预组与对照组比较IL-1β、IL-6和TNF-α表达量均降低（P<0.05）；Western blot示庆大霉素干预组上清及菌体中ExoA灰度值分别为43.73±1.07和73.53±1.90，均高于联合干预组的40.99±0.57和53.37±2.31（P=0.017，P=0.000）；qPCR显示庆大霉素组exoS与exoY表达水平高于联合干预组（P=0.003，P=0.011）。结论：穿心莲内酯可增强庆大霉素对烧伤组织的修复作用，其原因与穿心莲内酯促进庆大霉素对生物膜的破坏、炎症因子及毒力因子的减少有关。

摘要:目的：构建新型邻位触及诱导熵驱动信号放大策略用于DNA的高灵敏检测。方法：靶DNA诱导邻位连接，与两亲和探针共同形成夹心复合物，从而形成邻位引物。所获得的邻位引物通过介导分支迁移点亮熵驱动放大环路以实现DNA的检测。结果：在最优实验条件下，本工作所制备的DNA传感策略显示出非常高的灵敏度和选择性，动态范围从0.01~100 nmol/L，检测限低至6.7 pmol/L。结论：这种快速、高性价比和高效率的信号放大策略为DNA检测提供了一个简单且灵敏的平台。

摘要:目的：构建过表达Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5（fibronectin type Ⅲ domain-containing protein 5, FNDC5）基因的慢病毒载体，获得稳定转染FNDC5的THP-1细胞系。方法：PCR扩增目的基因FNDC5，将目的基因构建入pLenti-EF1a-EGFP-P2A-Puro慢病毒载体中，在DH5α感受态细胞中进行扩增，测序及鉴定合格后利用四质粒包装系统转染293T细胞，包装成过表达慢病毒颗粒并测定病毒滴度。Western blot检测重组慢病毒中FNDC5的表达情况后，将获得的重组慢病毒转染THP-1细胞系，荧光显微镜观察并计算其转染效率。经嘌呤霉素筛选建立FNDC5过表达的稳转细胞系后，将细胞分为3组，分别为空白组、空载组和FNDC5组，用Western blot及RT-PCR检测其FNDC5的表达情况。通过油红O染色后观察FNDC5过表达对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞脂质蓄积的影响。结果：PCR产物鉴定及测序结果显示成功构建FNDC5过表达慢病毒载体；转染293T细胞后可检测到绿色荧光，Western blot检测FNDC5-Flag标签有表达，包装后病毒的滴度为1.32×109 TU/mL；Western blot及RT-PCR检测重组慢病毒转染THP-1细胞系，与空载组对比，FNDC5组中FNDC5蛋白表达明显增加[（238.0±24.9）％]，有统计学意义（P=0.000）；与空载组对比，FNDC5组中FNDC5 mRNA表达水平明显增加[（228.5±3.4）％]，有统计学意义（P=0.000）。FNDC5过表达转染THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞中的脂质蓄积减少。结论：本实验成功构建了FNDC5基因的过表达慢病毒载体，通过FNDC5过表达慢病毒感染建立了FNDC5稳转的THP-1细胞系，证明FNDC5可明显减少THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的脂质蓄积，为后续研究奠定基础。

摘要:目的：研究吴茱萸碱丁酰基衍生物（evodiamine butyryl derivative，EAB）和吴茱萸碱丁酰基衍生物固体脂质纳米粒（evo－diamine butyryl derivative-loaded lipid nanoparticles，EABLN）在大鼠体内的多功能性药效学行为。方法：采用薄膜超声法制备EABLN，对制剂的外观、粒径、电位和包封率进行检测。将32只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、EAB治疗组、EABLN治疗组，每天监测大鼠的体质量变化。治疗组先连续口服灌胃给药治疗1周后，再口服灌胃次黄嘌呤并皮下注射氧嗪酸钾后成功造就了大鼠的高尿酸血症模型，检测血清中尿酸（uric acid，UA）、血肌酐（serum creatinine，CR）、尿素氮（usea nitrogen，BUN）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）水平，并进行心、肝、脾、肺、肾、脑组织病理学检查。结果：电镜结果显示，EABLN制备成功。体质量曲线结果显示不同组别对大鼠体质量影响未见不同，但4个组别在7个时间点上体质量有差异。生化指标结果显示，模型组UA、CR、BUN水平明显高于其他各组，差异有统计学意义（F=20.080，F=8.459，F=7.169；P=0.000，P=0.007，P=0.012）；4组间的血清ALT、AST水平均无统计学差异（F=1.701，F=3.528；P=0.244，P=0.068）。4组间的TC、TG、LDL和HDL水平均无统计学差异（F=3.069，F=0.398，F=0.191，F=3.291；P=0.091，P=0.758，P=0.899，P=0.079）。病理组织学检查表明，模型组的肾单位完整性被严重破坏，而经EABLN治疗后，逆转了高尿酸血症对肾脏的损害，且EABLN不会对心、肝、脾、肺、脑造成病变。结论：EABLN首次被发现能用于治疗高尿酸血症及其所引发的并发症。

摘要:目的：探讨赖氨酸特异性去甲基化酶5C（lysine-specific demethylase 5C，KDM5C）在骨肉瘤细胞有丝分裂期的变化及其对有丝分裂期纺锤体组装检查点（spindle assembly checkpoint，SAC）的调控。方法：利用细胞周期同步化方法，收集不同骨肉瘤细胞系有丝分裂期各时间节点的细胞样品，利用Western blot检测各时间点KDM5C蛋白质含量的变化及其翻译后修饰与有丝分裂期进程的关系；并用特异性抑制剂CPI-455抑制KDM5C的去甲基化转移酶活性，利用Western blot检测有丝分裂期进程中抑制KDM5C的去甲基化酶活性对SAC相关标志蛋白细胞分裂周期蛋白-27（cell division cycle protein 27，cdc27）、周期蛋白B1（Cyclin B1）的影响。结果：在有丝分裂进程中，与SAC相关的标志蛋白cdc27的磷酸化滞后条带的位移变化和Cyclin B1的蛋白降解均与文献报道相似，但KDM5C蛋白含量无明显变化；KDM5C截短体表达未观察到明显的位移减慢或泛素化降解条带；抑制其去甲基化酶活性后，相较对照组，标志蛋白cdc27的去磷酸化曲线和Cyclin B1降解曲线未见明显变化。结论：在骨肉瘤细胞系有丝分裂期中，KDM5C的蛋白质含量不随有丝分裂期进程而改变，抑制其去甲基化酶活性不影响对SAC的灭活。

摘要:目的：探讨miR-505对骨肉瘤细胞增殖、侵袭的影响及相关机制。方法：采用q-PCR测定人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中的miR-505水平。分别设置miR-505 mimics组与阴性对照 （miR-NC）组，采用LipofectamineTM 2000将miR-505 mimics及miR-NC转染至MG63细胞中，比较２组细胞增殖速率及侵袭细胞数，进一步采用Western blot及q-PCR考察转染miR-505的MG63细胞中MMP-9、CDK4、Cyclin-D1、HMGB-1及β-联蛋白（β-catenin）、磷酸糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）的蛋白及mRNA水平。结果：骨肉瘤细胞MG63中miR-505水平为0.57±0.06，明显低于人成骨细胞hFOB1.19的1.03±0.12（P<0.01）。转染miR-505后，miR-505 mimics组的表达量为3.59±0.37，明显高于miR-NC组的1.09±0.12（P<0.01）。miR-505 mimics组转染48 h和72 h后的OD450 nm值分别为0.84±0.09和1.29±0.13，均明显低于miR-NC组（P<0.05）。miR-505 mimics组侵袭细胞数为（42.84±4.35）个，明显低于miR-NC组的（66.84±6.85）个（P<0.05）。miR-505 mimics组MMP-9、CDK4、Cyclin-D1及HMGB-1蛋白水平均低于miR-NC组（P<0.05）。miR-505 mimics组MMP-9、CDK4、Cyclin-D1及HMGB-1 mRNA水平均低于miR-NC组（P<0.05）。同时，miR-505 mimics组Wnt信号通路中关键靶点β-catenin和GSK-3β蛋白与基因表达均明显低于miR-NC组（P<0.05）。结论：miR-505可通过抑制Wnt信号通路，下调MMP-9、CDK4、Cyclin-D1及HMGB-1表达，从而抑制骨肉瘤细胞的增殖与侵袭。

摘要:目的：对HIV-1 gp41蛋白的膜外区和跨膜区进行预测，并分析该蛋白的结构和功能。方法：从NCBI GenBank数据库获取gp41基因及其蛋白编码序列，利用ExPASy ProtParam tool、ProtScale、SignalP 4.0 Server、TMHMM Server v.2.0、SWISS-MODEL、PredictProtein等工具对gp41蛋白的生物学特性进行预测。结果：HIV-1 gp41基因ORF长度为666 bp，编码222个氨基酸，蛋白分子式为C1164H1815N317O325S6，等电点（isoelectric point，pI）＝8.60，属于稳定、疏水性蛋白。该蛋白具有跨膜区，信号肽切割位点位于第20和21位氨基酸处。其二级结构由无规则卷曲、β折叠和α螺旋组成，属于全螺旋型蛋白。而且该蛋白具有N-端信号肽，能引导蛋白分泌到胞外。此外gp41蛋白具有4个蛋白质-蛋白质和1个蛋白质-核酸结合位点，这些位点能调控gp41蛋白的多种生物学功能。结论：对gp41蛋白的结构和功能进行了预测，为深入研究其参与疾病发生发展的分子机制奠定了基础。

摘要:目的：探讨携带脂质运载蛋白2（lipocalin 2，Lcn2）的减毒沙门菌对分枝杆菌生长的影响。方法：以巨噬细胞RAW264.7提取RNA逆转录为cDNA为模版，采用PCR法扩增Lcn2基因，定向克隆到质粒pBudCE4.1-orim的多克隆位点中，构建重组质粒 pBudCE4.1-orim-Lcn2；将重组质粒转染RAW264.7细胞，用RT-qPCR法检测Lcn2的mRNA 相对表达量，并以空白载体为对照组；将重组质粒转入减毒沙门菌SL7207得到重组菌株 SL7207-pBudCE4.1-orim-Lcn2；重组菌感染RAW264.7细胞，Western blot检测Lcn2的蛋白表达，RT-qPCR法检测Lcn2的mRNA的相对表达量，并以空载菌组为对照；7H10平板上通过菌落计数观察重组菌对感染 RAW264.7 细胞的卡介苗（Bacille calmette-guerin，BCG）生存的影响，以空载菌组为对照。用重组菌灌胃小鼠，检测脾组织Lcn2和血清IFN-γ水平，以空载菌和生理盐水为对照组。结果：PCR扩增出Lcn2基因；重组质粒经双酶切及基因测序鉴定正确。重组菌感染 RAW264.7细胞Lcn2的蛋白表达量较对照组增加（P=0.000）。RT-qPCR 法检测重组菌、重组质粒Lcn2 mRNA表达较对照组明显升高（P=0.000，F=5.281；P=0.000，F=22570）。7H10平板上重组菌组BCG数量与空载菌组相比明显减少（P=0.000，F=11.41）。重组菌组与空载对照菌组相比小鼠脾组织 Lcn2表达升高（P=0.000，F=4.449），重组菌组与生理盐水组血清IFN-γ升高（P=0.004，F=15.27）。结论：成功构建了携带Lcn2基因的重组减毒沙门菌。重组菌感染RAW264.7细胞后Lcn2的表达增加，对感染RAW264.7的BCG存活起到一定的抑制作用。重组菌灌胃后小鼠脾组织Lcn2表达增加，血清IFN-γ含量增加，小鼠免疫状态有利于结核病转归。该研究为进一步研究脂质运载蛋白和结核分枝杆菌感染的关系及分子机制打下基础。

摘要:目的：进一步探索肿瘤相关基因磷脂酶Cδ1（phospholipase C δ1，PLCD1）对胰腺癌细胞系增殖、侵袭及迁移的影响和潜在分子行为机制。方法：用脂质体法将pcDNA3.1-PLCD1质粒转入肿瘤，同时设立空载体组；综合利用CCK-8、克隆形成实验、划痕实验和Transwell验证PLCD1对胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响，Western blot实验研究其潜在机制。结果：瞬时转染过表达质粒后的胰腺癌细胞CAPAN-1和BXPC-3中，PLCD1表达明显提高（P＜0.05）；CCK-8和克隆形成实验结果表明，高表达的PLCD1抑制胰腺癌细胞增殖速度（P＜0.05）；划痕实验和Transwell实验结果表明，细胞运动、侵袭及迁移能力下降（P＜0.05）。Western blot实验发现，MAPK/ERK通路中磷酸化的ERK 1/2，间质细胞标志分子N-cadherin和Vimentin表达受抑制（P＜0.05），同时上皮细胞标志分子E-cadherin表达上调（P＜0.05）。结论：本研究发现PLCD1可能通过抑制MAPK/ERK通路来抑制上皮间充质转化，从而抑制胰腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移。本研究为进一步探索PLCD1在胰腺癌中的作用机理奠定了基础。

摘要:目的：探究小檗碱对痛风性关节炎小鼠NLRP3/TLRs信号通路的调控作用。方法：C57BL/6小鼠随机均分为6组，分别为正常对照组，模型组，秋水仙碱组（阳性对照，0.65 mg/kg），小檗碱高、中、低剂量组（150、100、50 mg/kg），造模给药7 d，每天测定小鼠踝关节肿胀度，观察治疗作用；同时，采用ELISA法测定血清白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、白细胞介素-6（inter－leukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）及干扰素-α（interferon-α，IFN-α）表达水平。进一步采用RT-PCR、Western blot分别检测关节滑膜组织中NLRP3/TLRs关键靶点基因及蛋白的表达。结果：关节肿胀度结果显示，小檗碱高、中、低剂量组（分别为18.35%、21.35%、25.35%）和秋水仙碱组（15.35%）与模型组（31.34%）比较明显降低，差异具有统计学意义（F=11.240，P=0.005）。且各剂量小檗碱治疗后，小鼠踝关节滑膜组织中炎性细胞浸润及水肿现象明显减轻。ELISA结果显示，与模型组比较，小檗碱各组小鼠血清IL-2、IL-6、TNF-α及IFN-α表达水平均明显下降（IL-2：F=5.690，P=0.005；IL-6：F=10.370，P=0.009；TNF-α：F=15.240，P=0.002；IFN-α：F=4.520，P=0.02）。RT-PCR及Western blot结果显示，小檗碱高、中、低剂量组的小鼠滑膜组织NLRP3、TLR3、TLR7、MyD88及NF-?资B p65的基因和蛋白表达均明显降低（P<0.05）。结论：小檗碱能缓解小鼠痛风性关节炎，其机制可能与下调炎症因子水平，抑制NLRP3/TLRs信号通路有关。

摘要:目的：观察F框/WD40域蛋白7（Fbxw7）在急性T淋巴细胞白血病中的表达，探讨其对细胞生长的影响及其机制。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测62例急性T淋巴细胞白血病患者中的Fbxw7 mRNA表达情况，将携带Fbxw7的过表达慢病毒载体转至白血病Jurkat细胞后，采用RT-PCR和Western blot检测其转染效果，MTT法检测Jurkat细胞增殖情况，流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞凋亡情况，Western blot检测c-Myc蛋白和周期蛋白E（Cyclin E）的表达。结果：急性T淋巴细胞白血病复发组患者和初发组患者中Fbxw7 mRNA表达水平较正常健康人明显降低（P<0.05）；病毒转染后，Fbxw7组（转染携带Fbxw7过表达慢病毒载体）中Fbxw7 mRNA和蛋白质的相对表达水平较对照组（未转染的细胞）、阴性组（转染对照慢病毒载体）明显升高（P<0.05）；转染24 h后，细胞增殖受影响不明显（P>0.05），而转染48 h和72 h后，细胞增殖明显受到抑制（P<0.05）；转染48 h后，与对照组相比，Fbxw7组Jurka细胞中G0/G1期细胞所占比例和细胞凋亡率明显升高，S期和G2/M期细胞所占百分比、c-Myc和Cyclin E蛋白的相对表达量明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：Fbxw7在急性T淋巴细胞白血病中低表达，上调其表达可抑制白血病Jurkat细胞增殖，促进细胞凋亡，其作用机制可能与下调c-Myc和Cyclin E蛋白表达有关。

摘要:目的：探讨血浆中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL）水平对哮喘慢阻肺重叠的诊断价值。方法：选择哮喘-慢阻肺重叠（asthma-COPD overlap，ACO）患者30例，哮喘患者35例，慢性阻塞性肺病（chromic obstructive pulmonary disease，COPD）患者60例及健康未吸烟者（对照）25例。收集受试者一般资料，完善肺功能检查，应用ELISA法检测受试者血浆NGAL水平。单因素方差分析评价血浆NGAL水平在ACO组、哮喘组、COPD组和对照组中的表达差异，分析NGAL与各混杂因素的相互关系，应用受试者操作特征曲线评价血浆NGAL水平对于区分ACO和非ACO的诊断学价值。结果：①ACO组和COPD组的血浆NGAL水平分别为（110.50±22.81） ng/mL和（127.40±27.57） ng/mL，均高于哮喘组[（85.79±20.02） ng/mL]和对照组[（86.54±23.46） ng/mL]。血浆NGAL水平在ACO组和哮喘组、ACO组和COPD组之间均有统计学差异（P=0.000，P=0.015）。②血浆NGAL水平与药后一秒钟用力呼气容积（forced expiratory volume in one second，FEV1）呈负相关（r=-0.422，P=0.000），与吸烟指数呈正相关（r=0.500，P=0.000）。③血浆NGAL水平的AUC为0.565（P=0.273）。结论：血浆NGAL对于ACO、哮喘和COPD的鉴别有一定的参考价值，可能是ACO潜在的生物标志物。

摘要:目的：探讨固有淋巴细胞（innate lymphoid cells，ILCs）亚群与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）发生发展及预后的关系。方法：选取2012年1月至2014年1月安徽医科大学第一附属医院收治的70例均经病理学诊断为NSCLC的患者为NSCLC组，选择同期来本院的性别比、年龄相匹配的70例健康体检者为对照。采用流式细胞技术检测２组ILCs亚群比例，采用酶联免疫吸附法检测ILCs亚群相关细胞因子水平，收集患者临床资料与随访资料，分析ILC第一亚群（innate lym－phoid cell type 1，ILC1）、ILC第二亚群（innate lymphoid cell type 2，ILC2）、ILC第三亚群（innate lymphoid cell type 3，ILC3）与NSCLC临床特征、预后的关系。结果：与对照组相比，NSCLC组ILC1及干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）水平分别为（8.61±3.78）%和（27.24±12.85） ng/L，明显降低（P＜0.05），ILC2、ILC3、白细胞介素-5（interleukin-5，IL-5）和白细胞介素-17（inter－leukin-17，IL-17）水平分别为（1.29±0.64）%、（3.64±1.93）%、（22.70±9.94） ng/L和（8.10±2.09） ng/L，明显升高（P＜0.05）。ILC1与IFN-γ呈明显正相关（r=0.780，P＜0.05），ILC2与IL-5呈明显正相关（r=0.704，P＜0.05），ILC3与IL-17呈明显正相关（r=0.654，P＜0.05）；ILC1、ILC2及ILC3水平均与淋巴结转移及TNM分期有关（P＜0.05）。无淋巴结转移、TNM分期较低、ILC1水平≥8.98%、ILC2水平＜1.37%的患者总生存期（overall survival，OS）明显较长（P＜0.05）。ILC1≥8.98%的患者中位生存时间为49个月，ILC1＜8.98%的患者中位生存时间为38个月，2组生存曲线有明显差异（P＜0.05）。ILC2≥1.37 %的患者中位生存时间为34个月，ILC2＜1.37%的患者中位生存时间为46个月，2组生存曲线有明显差异（P＜0.05）。多因素分析结果显示，淋巴结转移，TNM Ⅲ、Ⅳ分期，ILC2≥1.37%是OS的独立危险因素（P＜0.05），ILC1≥8.98%是OS的独立保护因素（P＜0.05）。结论： NSCLC患者表现为ILCs亚群失衡，ILC2、ILC3亚群具有明显优势，检测ILC1、ILC2亚群水平可在一定程度上评估患者疾病发展与预后情况。

摘要:目的：探讨连续流动离心式血液成分分离机高量减除血小板治疗对血小板增多症患者综合性凝血指标及血浆纤维蛋白原浓度的影响。方法：采用COBE Spectra连续流动离心式血液成分分离机ELP或MNC程序，以ACD-A配方血液保存液为抗凝剂，对血小板增多症患者实施减除血小板治疗，每次治疗设置处理血量为2.5～3.0倍总血容量（total blood volume，TBV），采集血小板悬液容量为20%～25%TBV，对21例患者共进行32次减除血小板治疗，观察血小板减除效果及治疗前、后凝血指标和血浆纤维蛋白原浓度的差异。结果：单次治疗运行时间（212.53±41.54） min，处理血量（8 812.63±2 087.15） mL，采集血小板悬液容量（798.84±190.77） mL；治疗前、后患者循环血液血小板计数（platelet count，Plt）分别为（1 426.46±530.23）×109个/L、（778.83±247.25）×109个/L（t=10.808，P=0.000），凝血酶原时间（prothrombin time，PT）分别为（12.82±1.53） s、（13.28±1.51） s（t=3.921，P=0.000），活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，aPTT）分别为35.75（29.43，37.55） s、35.40（31.20，38.20） s（Z=3.021，P=0.003），凝血酶时间（thrombin time，TT）分别为（17.46±1.30） s、（17.88±1.41） s（t=2.783，P=0.009），纤维蛋白原浓度（fibrinogen concentration，Fbg）分别为（2.96±1.18） g/L、（2.81±1.11） g/L（t=3.433，P=0.002）。结论：采用连续流动离心式血液成分分离机对血小板增多症患者实施高量减除血小板治疗，可显著降低患者体内血小板负荷；对患者PT、aPTT、TT、Fbg的影响在机体正常代偿范围内。

摘要:目的：探讨儿童早期预警评分在中性粒细胞缺乏白血病患者发生感染性休克中的临床应用效果。方法：将重庆医科大学附属儿童医院2016年1月至2016年12月住院的67例白血病化疗后中性粒细胞缺乏合并感染患者作为回顾观察组，对其临床资料进行回顾性研究，根据患者监测值进行早期预警评分，构建ROC曲线，得出该组患者发生感染性休克的早期预警截断点，以2017年1月至2017年12月白血病化疗后中性粒细胞缺乏合并感染的72例患者作为前瞻研究组，将早期预警评分应用于研究组患者的早期评估，根据不同早期预警评分值实施相应的抗感染治疗、给氧、液体复苏、血管活性药物、成分输血、应用重组活化蛋白C等干预措施；比较2组患者感染性休克的发生率及休克致死亡率。结果：早期预警评分3.5分为预测中性粒细胞缺乏白血病患者发生感染性休克的最佳截断点，在该截断点，PEWS对感染性休克预测的灵敏度为83.3%，特异度为83.7%；研究组感染性休克发生率及病死率明显低于观察组（P<0.01）。结论：早期预警评分能帮助护理人员对病情进行有效评估，根据早期预警评分，帮助其早期识别中性粒细胞缺乏白血病患者感染性休克的征象，同时在最佳截断点及时采取针对性的治疗、护理干预，有效改善疾病的预后。

摘要:目的：探讨重庆江北区居民不同症状失眠成人中高血压的患病风险。方法：随机选择重庆江北区2 000名居民为研究对象，持续一周出现一种及以上失眠症状作为失眠人群，其余作为不失眠人群。根据研究对象的入睡时间、觉醒次数、早醒时间和总睡眠时间划分出4种特定失眠症状人群（入睡困难、睡眠维持障碍、早醒和总睡眠时间减少），并对其高血压患病风险进行logistic回归分析。结果：612人（30.6%）持续失眠1周以上，为失眠人群，其最主要症状是睡眠维持障碍（8.0%）。失眠人群的家庭收入、体质量超重比例和饮酒比例均明显高于不失眠人群（P<0.05）。不同失眠症状人群中，入睡困难人群的经典高血压（收缩压>140 mmHg，舒张压>90 mmHg）的患病率最高（6.4%）；睡眠维持障碍人群单纯性收缩期高血压患病率最高（7.0%）；早醒人群经典高血压患病率最高（6.6%）；总睡眠时间较少人群经典高血压患病率最高（6.9%）。睡眠维持障碍人群单纯性收缩期高血压患病风险明显高于不失眠人群（OR=1.603，95%CI=1.042~2.466，P<0.05），总睡眠时间减少人群经典高血压患病风险明显高于不失眠人群（OR=1.711，95%CI=1.086~2.696，P<0.05）。结论：失眠成人的高血压患病风险较高。睡眠维持障碍和总睡眠时间减少与高血压的患病风险密切相关。

摘要:目的：使用中文版重症监护疼痛观察工具（Critical-Care Pain Observation Tool，CPOT）比较有创机械通气患者在翻身前、翻身中及翻身后对疼痛的行为反应及生理反应。方法：选取2015年1月至2017年1月在某大学三级综合医院呼吸内科重症监护病房（intensive care unit，ICU）进行有创机械通气治疗的120例患者作为研究对象，使用中文版CPOT在患者实施翻身操作的3个阶段（翻身前1 min、翻身中及翻身后10 min）对患者的疼痛反应进行观察，记录患者在各个阶段的CPOT得分、各测量条目得分、各项生理学指标（平均动脉压、心率、呼吸频率、血氧饱和度）及各测量条目得分为1～2分的观察百分比。比较不同阶段CPOT得分、各测量条目得分及各项生理学指标的差异性。结果：实施翻身操作前1 min的CPOT得分为0.35±0.99，翻身操作中CPOT得分为1.96±1.77，翻身操作后10 min的CPOT得分为0.12±0.58；面部表情与基线测量相比增加幅度最大（最大占比72%），其次分别是身体活动（最大占比47%）、机械通气顺应性（最大占比36%），最后是肌肉紧张度（最大占比36%）。有创机械通气患者在实施翻身操作的不同阶段CPOT得分及各项生理学指标变化均有统计学差异（P<0.05）。结论：通过观察有创机械通气患者在翻身操作过程中的行为及生理变化，医务人员可以对语言沟通障碍危重患者的疼痛进行客观化评估。中文版CPOT量表可以有效测量患者的疼痛过程，值得在有创机械通气患者中推广应用。

摘要:目的：了解我国家加速康复外科研究现状和知识基础，为我国加速康复外科继续发展提供参考。方法：以Web of Sci－ence数据库为文献来源，检索我国加速康复外科相关文献，分析文献基本情况后利用CiteSpace对文献引文进行可视化分析。结果：共检出169篇中国加速康复外科相关SCI文献，文献数量近10年呈上升趋势，文献研究类型多为实验性研究，研究内容和知识基础涉及领域主要为胃肠外科和肝胆胰外科。结论：中国加速康复外科需要可操作性和可重复性强的实践方案，患者报道预后和患者观点需要被关注，以帮助改进、优化加速康复外科实施策略。